实验四不规则抗体筛选与鉴定、效价测定.pptVIP

不规那么抗体筛选与鉴定

及抗体效价检测;一、不规那么抗体筛选与鉴定

目的：检测有临床意义的不规那么抗体

原理：受检血清+筛选细胞〔一组3人份〕筛选

受检血清+谱细胞〔一组10人份〕鉴定

方法:①盐水法②聚凝胺法③抗人球法

器材:小试管、滴管、试管架、记号笔、冰箱、离心机、

37℃水浴箱

试剂:筛选细胞、谱细胞

标本:血清或血浆;1.筛选

⑴标管8支:S1、S2、S3、S1’、S2’、S3’、K、自c

⑵加样：受检血清2滴+上述细胞1滴检测

⑶观察结果:阳性进行不规那么抗体鉴定

⑷测抗体效价〔室温、4℃10min、恢复室温10min、37℃3min〕;2.鉴定;本卷须知

1.筛选细胞凝集〔盐水法、聚凝胺法、抗人球法〕，要鉴定抗体特异性。

2.谱细胞凝集程度试管集中比照观察1+w、1+、1+s。

3.自身凝集与否要进行观察。

4.盐水中有凝集可能为：有格局〔抗-M、抗-P〕；无格局〔抗-I、抗-HI〕。无凝集用凝聚胺法或抗人球法，以检查有无IgG抗体。;二、血型抗体效价测定〔IgM、IgG〕;实验步骤

1.标记管号：1、2、4、8、16、32……

2.从2号开始各管分别加生理盐水50ul

3.加血清：1、2管各加血清

4.倍比稀释：将2号管混匀，从中吸出50ul移入

第3管，混匀；再从第3管吸出50ul移入第4

管，以此类推，至最后一管，吸出50ul弃去。

5.加悬红：每管各加50ul，混匀。

6.3000r／min离心15秒，直接观察结果、

4℃10min、室温10min、37℃3min观察结果。;本卷须知

1.更换滴管，防止干扰

2.防止前带现象，看结果从高稀释度开始

3.试剂细胞

4.稀释液体积越小，产生误差越大;思考题