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专题1基因工程
1.2基因工程的基本操作程序
课后篇巩固提升
基础巩固
1.基因比较小,且核苷酸序列已知,获得该基因的最佳方法是()
A.以mRNA为模板反转录合成DNA
B.以4种脱氧核苷酸为原料人工合成
C.将供体DNA片段转入受体细胞中,再进一步筛选
D.先建立基因文库,再从中筛选
答案B
解析目的基因的获取方法主要有三种:从基因文库中获取、利用PCR技术扩增、人工合成。对于比较小且核苷酸序列已知的目的基因,可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。
2.基因工程的核心是()
A.目的基因的获取 B.基因表达载体的构建
C.将目的基因导入受体细胞 D.目的基因的检测与鉴定
答案B
3.人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工。通过转基因技术等,可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是()
A.大肠杆菌 B.大肠杆菌质粒
C.T4噬菌体 D.酵母菌
答案D
解析糖蛋白上有共价结合的糖链,这些糖链是在内质网和高尔基体上加工完成的,大肠杆菌属于原核生物,细胞内无内质网、高尔基体等细胞器,A项错误;大肠杆菌质粒的化学本质是环状的DNA,不能作为受体细胞,B项错误;T4噬菌体是病毒,不能作为受体细胞,C项错误;酵母菌为真核生物,细胞内有内质网和高尔基体等细胞器,D项正确。
4.将目的基因导入玉米茎尖分生区细胞和小鼠受精卵,应采用的方法分别是()
A.显微注射技术农杆菌转化法
B.基因枪法花粉管通道法
C.农杆菌转化法显微注射技术
D.基因枪法显微注射技术
答案D
解析玉米是单子叶植物,对单子叶植物来说,常用的方法是基因枪法;对动物细胞来说,常用的方法是显微注射技术。
5.检测转基因生物染色体DNA上是否插入了目的基因的常用方法是()
A.DNA分子杂交技术 B.荧光分子标记技术
C.放射性同位素标记技术 D.显微注射技术
答案A
解析检测目的基因常采用DNA分子杂交技术,即在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素进行标记,以此作为基因探针,并使基因探针与基因组DNA杂交,若显示出杂交带,则表明目的基因已插入染色体DNA中。
6.农杆菌中含有一个大型的Ti质粒(如右图所示),在侵染双子叶植物细胞的过程中,其中的T-DNA片段可转入植物的染色体DNA上。若想用基因工程并通过农杆菌向某种双子叶植物中导入抗旱基因,下列分析不合理的是()
A.若用Ti质粒作为抗旱基因的载体,目的基因的插入位置应该在T-DNA片段内,且要保证复制原点、启动子和终止子不被破坏
B.将重组Ti质粒导入农杆菌之前,可以用Ca2+处理农杆菌
C.转基因抗旱植物培育是否成功的最简单检测方法是看该植物是否具有抗旱性状
D.若能够在植物细胞中检测到抗旱基因,则说明该基因工程项目获得成功
答案D
解析若用Ti质粒作为抗旱基因的载体,目的基因的插入位置应该在T-DNA片段内,且要保证复制原点、启动子和终止子不被破坏;将重组Ti质粒导入农杆菌之前,可以用Ca2+处理农杆菌,便于完成转化;转基因抗旱植物培育是否成功的最简单检测方法是看该植物是否具有抗旱性状;能够在植物细胞中检测到抗旱基因及其表达产物,或转基因植物表现出抗旱性状,才能说明该基因工程项目获得成功。
7.下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内,制备“工程菌”的示意图。
请据图回答下列问题。
(1)获得A有两条途径:一是以A的mRNA为模板,在酶的催化下,合成互补的单链DNA,然后在的作用下合成双链DNA,从而获得所需基因;二是根据目标蛋白质的序列,推测出相应的mRNA序列,然后按照碱基互补配对原则,推测其DNA的序列,再通过化学方法合成所需基因。?
(2)利用PCR技术扩增DNA时,需要在反应体系中添加的有机物质有、、4种脱氧核苷酸和热稳定DNA聚合酶,扩增过程可以在PCR扩增仪中完成。?
(3)由A和载体B拼接形成的C通常被称为。?
(4)在基因工程中,常用Ca2+处理D,其目的是?
。?
答案(1)反转录DNA聚合酶氨基酸脱氧核苷酸
(2)引物模板(目的基因或基因A)(3)基因表达载体
(4)使大肠杆菌成为感受态细胞,更容易吸收重组DNA分子
解析(1)利用反转录法合成目的基因的过程:以mRNA为模板,在反转录酶的催化作用下合成单链DNA,然后在DNA聚合酶的作用下合成双链DNA分子。蛋白质合成目的基因的过程为:根据目标蛋白质的氨基酸序列,推测相应的mRNA序列,然后按照碱基互补配对原则,推测DNA中脱氧核苷酸的序列,通过化学方法合成。(2)PCR过程中需要热稳定DNA
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