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第2节第1课时筛选和获取目的基因与构建基因表达载体
A组必备知识基础练
1.下列有关获取目的基因的叙述,错误的是()
A.目的基因就是编码蛋白质的基因
B.获取目的基因是基因工程的第一步
C.来自苏云金杆菌的Bt抗虫蛋白基因可作为转基因抗虫棉的目的基因
D.序列比对工具的应用为科学家找到合适的目的基因提供了更多的机会和可能
2.(广东茂名统考)在细菌和病毒类疾病检测、遗传疾病诊断、肿瘤筛查和诊断中,都可采用PCR技术。PCR反应由变性、复性、延伸三个基本反应步骤构成,PCR完成以后常需要鉴定PCR的产物。下列叙述正确的是()
A.变性:耐高温的DNA聚合酶将双链DNA解聚为单链
B.复性:两种引物与两条单链DNA结合不必控制温度
C.延伸:4种脱氧核苷酸加到引物的5端
D.鉴定:DNA聚合酶质量不好可能导致鉴定结果不只有一条带
3.PCR技术是在DNA聚合酶的作用下,在体外进行DNA大量扩增的一种分子生物技术。下列叙述正确的是()
A.双链DNA在高温下氢键和磷酸二酯键断裂形成2条DNA单链
B.温度降低后,单链DNA和引物结合的部分碱基序列相同
C.以2条DNA单链为模板,以4种NTP为原料,在耐高温DNA聚合酶的作用下合成2个新的DNA
D.设置PCR仪的温度进行反应可重复循环多次,DNA呈指数式扩增
4.关于基因表达载体构建的叙述,下列说法不正确的是()
①一个基因表达载体的组成只包括目的基因、启动子、终止子②有了启动子才能驱动基因转录出mRNA③终止子的作用是使转录在所需要的地方停止④所有基因表达载体的构建都是完全相同的
A.②③ B.①④
C.①② D.③④
5.下列关于基因表达载体构建的叙述,错误的是 ()
A.启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位,组成它的基本单位是脱氧核苷酸
B.基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止密码子、标记基因等
C.人工构建的诱导型启动子,当诱导物存在时,可激活或抑制目的基因的表达
D.由于受体细胞不同,基因表达载体的构建也有所差别
6.在基因工程的操作过程中,获得重组质粒不需要 ()
①DNA连接酶②限制酶③RNA聚合酶④具有标记基因的质粒⑤目的基因⑥四种脱氧核苷酸
A.③⑥ B.②④
C.①⑤ D.①②④
7.某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内,使其表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因:A是抗链霉素基因,B是抗氨苄青霉素基因,且目的基因要插入基因B中,而大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是()
A.导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒
B.研究过程需要使用限制酶、DNA连接酶和载体这些专门的工具酶
C.可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
D.在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌
8.在核酸分子杂交技术中,常常使用已知序列的单链核酸片段作为探针(探针是指以放射性同位素、生物素或荧光染料等进行标记的已知核苷酸序列的核酸片段)。为了获得B链作探针,可应用PCR技术进行扩增,应选择的引物种类是()
A.引物1与引物2
B.引物3与引物4
C.引物2与引物3
D.引物1与引物4
9.基因工程的核心是基因表达载体的构建,下列不属于载体作用的是()
A.载体能防止目的基因被受体细胞限制酶“切割”
B.载体能协助目的基因在受体细胞中复制
C.载体含有启动子和终止子,能协助目的基因表达
D.载体具有标记基因,便于筛选含目的基因的受体细胞
10.基因工程中可以通过PCR技术扩增目的基因。请回答下列问题。
(1)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解聚为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。?
(2)目前在PCR反应中不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是。?
(3)含有限制酶的细胞中通常还具有相应的甲基化酶,这两种酶对DNA分子有相同的作用序列,但具有不同的催化功能。甲基化酶可以对DNA序列进行修饰,使限制酶不能对这一序列进行识别和切割。含有某种限制酶的细胞,可以利用限制酶切割外源DNA,但不破坏细胞自身的DNA,其原因可能有:①;②。?
(4)利用PCR扩增目的基因的过程由高温变性(90℃以上)、低温复性(50℃左右)、适温延伸(72℃左右)三个步骤构成一个循环,为使得DNA聚合酶
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