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改良CTAB法提真菌DNA.pdfVIP

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改良CTAB法提真菌DNA

1、将摇好的菌丝过滤,用吸水纸吸干。

2、用液氮研磨,4次左右,磨碎为止。

3、将粉末装入10ml离心管中,加入4mlCTAB。

4、65ºC温育30分钟,每隔10分钟颠倒混匀一次。

5、加4mlCIA,开盖,在通风柜中放1~2分钟。盖盖,在摇床上轻轻

混合15~20分钟。10000rpm,离心10分钟

6、仔细回收水(上)相于试管中。水相用CIA重新抽提一次。

7、水相试管中,加入等体积异丙醇,沉淀核酸。轻轻颠倒混匀数次,

静置5分钟。(注意:不能带有CIA相液体,有时沉淀

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