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实验九大肠杆菌大肠杆菌:是引起家畜、家禽大肠杆菌病的病原。可导致家畜、家禽死亡;大肠杆菌是条件致病菌。心包炎、肝周炎学习大肠杆菌与沙门氏菌常规微生物学诊断方法。了解大肠杆菌与沙门氏菌的形态与染色特性。熟悉大肠杆菌与沙门氏菌的主要培养特性。实验目的:大肠杆菌与沙门氏菌的常规
实验室诊断可按阶段划分01020304增菌、直接分离培养纯培养、识别菌落、三糖铁接种。生化鉴定(IMViC、H2S、硝酸盐还原、运动力、五种糖)血清学鉴定。阶段划分(1—4阶段)沙门氏菌、大肠杆菌的一般诊断程序图病料增菌(亚硒酸盐汤等)37℃、18-24h直接划线分离(麦康凯、SS琼脂和EMB培养基)37℃、18-24h选可疑菌落,移植到以下培养基营养琼脂斜面三糖铁琼脂37℃、18-24h纯种检验、革兰氏染色镜检生化反应血清学鉴定内脏、淋巴结液态材料小家畜、家禽或胎儿病毒材料50%甘油磷酸盐缓冲液怀疑死于炭疽的动物严禁尸体剖解。有针对性的采集病料。作好个人的防护和环境消毒工作。盛装病料的容器要求无菌。无菌操作。病料必须注明名称。必须低温保存,及早送检。动物尸体必须妥善处理(深埋、焚烧)。【动物尸体剖解的注意事项】SS平板-分离肠道病原菌的强选择培养基成分和作用:基础培养基:提供氮源和碳源胆盐、枸橼酸钠、煌绿:可抑制肠道非致病菌的生长,而对肠道致病菌抑制作用弱。乳糖,中性红(,红→橙黄):致病菌不分解乳糖,但分解蛋白胨产生碱性物质→菌落淡黄色;大肠杆菌分解乳糖产酸,菌落呈红色麦康凯培养基—具中等强度选择性,抑菌力长,而对伤寒等沙门菌有促进生长的作用.
利用乳糖发酵,中性红的颜色可把分解乳和沙门菌及志贺菌呈无色菌落,略强,少数阴性菌不生长。
利用胆盐、龙胆紫来抑制革兰阳性细菌的生不分解乳糖的细菌区别开.大肠埃希菌呈桃红色菌落.病原菌:透明,无色
非致病菌:紫黑色EMB(EosinMethylBlue)平板-分离肠道病原菌的弱选择培养基解剖病死鸭01010203040506心脏、肝脏等脏器的分离接种(SS平板、三糖铁琼脂)组织触片(血片、肝片等)、吉姆萨染色、镜检37℃、18-24h观察、记录结果出具实验报告0203040506本次实验操作步骤:
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