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诱导型多能干细胞在体外三维环境中诱导分化出肠道类器官

李向阳1，赵鑫1，相小松1，郑鹏1，惠璜2，嵇武1(1南京大学医学院附属金陵医院，解放军南京军区南京总医院解放军普通外科研究所，江苏省南京市210002；2解放军第二军医大学，上海市200433)

引用本文：李向阳，赵鑫，相小松，郑鹏，惠璜，嵇武.诱导型多能干细胞在体外三维环境中诱导分化出肠道类器官[J].中国组织工程研究，2017，21(25):4057-4061.

DOI:7.25.020ORCID:0000-0002-6058-2888(嵇武)

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诱导型多能干细胞向肠道类器官的分化李向阳，男，1989年生，安徽省亳州市人，汉族，南京大学在读硕士，主要从事肝胆胰腺外科研究。通讯嵇武，主

诱导型多能干细胞向肠道类器官的分化

李向阳，男，1989年生，安徽省亳州市人，汉族，南京大学在读硕士，主要从事肝胆胰腺外科研究。

通讯嵇武，主任医师，教授，南京大学医学院附属金陵医院，解放军南京军区南京总医院解放军普通外科研究所，江苏省南京市210002

中图分类号:R394.2

文献标识码:B

文章编号:2095-4344

(2017)25-04057-05

稿件接受：2017-0

LiXiang-yang,Studyingformaster’sdegree,JinlingHospital,MedicalSchoolofNanjingUniversity,PLAResearchInstituteofGeneralSurgery,NanjingGeneralHospitalofNanjingMilitaryRegion,Nanjing210002,JiangsuProvince,China

Correspondingauthor:

JiWu,Chiefphysician,Professor,JinlingHospital,MedicalSchoolofNanjingUniversity,PLAResearchInstituteofGeneralSurgery,NanjingGeneralHospitalofNanjingMilitaryRegion,Nanjing210002,JiangsuProvince,China

B6J

B6J小鼠18代诱导型多能干细胞

参加含成纤维细胞生长因子4和Wnt3A的培养基培养4d参加含有激活素

参加含成纤维细胞生长因子4和Wnt3A的培养基培养4d

参加含有激活素A的培养基培养3d

参加HEPES、Rspondin1、头蛋白、表皮细胞生长因子、B27添加剂等生长因子

诱导型多能干细胞在体外三维环境中诱导分化出肠道类器官

在

在ES-DMEM培养基中培养3d

文题释义：

肠道类器官：肠道类器官是衍生于多能干细胞或肠道前体祖细胞，在细胞成分、特定功能和组织结构等方面与相应的器官高度相似，包含肠道隐窝结构及构成隐窝的干细胞、潘斯细胞、杯状细胞和内分泌细胞等。

摘要

背景：诱导型多能干细胞是一类特殊的细胞，具有自我更新及多向分化潜力，在一定诱导条件下能够分化为肠道类器官。

目的：探究诱导型多能干细胞在体外特定条件下是否可分化出肠道类器官。

方法：复苏B6J小鼠18代诱导型多能干细胞，培养3d克隆单位覆盖培养皿80%左右后，参加含有激活素A的培养基培养3d，得到确定性内胚层，参加含成纤维细胞生长因子4和Wnt3A的培养基培养4d，得到中后肠细胞球，将其与Matrigel培养基混合后滴入四孔板形成滴株样生长，在HEPES、Rspondin1、头蛋白、表皮细胞生长因子、B27添加剂等生长因子等共同作用下向肠道类器官分化，期间观察细胞形态变化，检测确定性内胚层FoxA2、Sox17表达，中后肠细胞球特异性标记物CDX2表达，肠道类器官特异性标记物Sox9、CGA、MMP7表达。

结果与结论：①诱导型多能干细胞在含有激活素A的培养基培养3d，细胞初步分化，相互融合，确定性内胚层标记物FoxA2、Sox17表达较诱导型多能干细胞明显升高(P0.05)；②确定性内胚层在含成纤维细胞生长因子4和WNT3A环境下培养第3天开始就有少量中后肠细胞球形成，第4天大量中后肠细胞球形成，中后肠细胞球标记物CDX2较确定性内胚层明显升高(P0.05)；③中后肠细胞球培养3d后逐渐形成肠道类器官，其特异性标记物Sox9、CGA、MMP7表达明显高于中后肠细胞球(P0.05)；④结果说明，诱导型多能干细胞可在体外三维环境中诱导分化出类肠道器官。

关键词：

干