仪器分析-UV-VIS-MFA-标准曲线法与-直接对比法.docx

第一题：实验对比

方法原理

标准曲线法：配制系列不同溶液浓度，通过空白溶液求出不同被测溶液的吸光度，再绘制出不同溶液下的吸光度曲线图。

直接对比法：配制与其标准溶液相近的溶度溶液，根据吸收定律，推算出溶液浓度。

优缺点

标准曲线法：过程繁琐，相对复杂，误差相对较小。

直接比较法：比较简单，但相对误差大。

适用范围

标准曲线法：批量样品的分析测量。

直接比较法：与标准溶液浓度相近的溶液。

第二题：P476题

(1)结论Y=0.8054X+1.1299A=KBC,K为斜率0.8053，此处即为吸光系数.

(2)由题可知有机溶剂为本次实验的溶剂，则为空白溶液，空白溶液不含被测组分，不考虑干扰，则X=0，由A=Y=1.13C=19.2mol/Lb=1cm

ε=AbC=1.13*10

(3)如果使用该有机溶剂作为参比溶液，会调有机溶剂的吸光度为0，所以整体的吸光度会降低，标准曲线通过或接近原点

(4)A=log101

A=0.4814

C=Ab

第三题比较UV-VIS与MFA的异同

比较项目

紫外-可见分光光度法UV-VIS

分子荧光分析法MFA

基本原理

物质分子对紫外和可见光谱区电磁辐射的吸收特征和吸收程度而建立起来的定性、定量分析方法

物质分子在外界能量作用下从基态跃迁到激发态时以发射辐射能的形式释放能量，通过测量某些物质的分子发射辐射能的特性、强度对物质进行定量定性分析的方法

光谱

吸收光谱以波长为横坐标，吸光度为纵坐标。

最大吸收峰对应λ

激发光谱和荧光光谱以波长为横坐标，荧光强度为纵坐标。

在激发光谱中最大荧光强度所对应的波长为λ

在荧光光谱中最大荧光强度所对应的波长为λ

光谱特征

突起部分称吸收峰，最大吸收峰对应波长为最大波长

吸收峰旁形状像肩的弱吸收峰叫肩峰

在短波长端出现强吸收不成波形叫末端吸收电子能级跃迁产生光谱

宏观上：光通过物质光强度变小

微观上：低能级跃迁到高能级

荧光光谱的形状与激发波长无关

荧光波长比激发波长长

激发光谱与荧光光谱呈镜像对称关系，激发光谱在左，荧光光谱在右

能量跃迁

电子能级跃迁产生光谱

宏观上：光通过物质光强度变小

微观上：低能级跃迁到高能级

电子能级跃迁产生光谱

振动弛豫、内部转移、荧光、系间窜跃、磷光

光谱提供信息

定性分析：形状、λ

定量分析：选择λmax

谱带的强度与分子偶极矩变化、跃迁几率有关以提供分子信息

除了光谱信息外还有荧光强度、效率、寿命等信息

分析仪器

都有五个部分组成：光源、单色器、吸收池、检测器、显示系统

只有一个单色器，为平行光路，比色皿可以用玻璃和石英，有两个粗糙面两个光滑面

有两个单色器，为垂直光路，比色皿只能为石英，且四面光滑

单色器作用

获得单色光

限制杂散光进入

控制光强度

选择所需波长

第一单色器：选择特定波长的激发光

第二单色器：把杂质所引起的荧光除去让特征波长通过

检测器的选择

常用检测器有光电管、光电倍增管和光电二级管列阵检测器

要求灵敏度高，多采用光电倍增管检测

方法特点

有些物质在紫外或可见光区有较强的吸收，需要生色团，和助色团增加生色团的生色能力，很多物质在紫外可见光区范围没有吸收、或者吸收较弱可以用显色反应增强能力，但它受到温度、酸度、时间和干扰离子的影响

自然界中发荧光的物质十分罕见有机化合物中，有共轭的π键结构和刚性平面结构，才可能有荧光，取代基、吸电子基团也会有影响。无机物中一些金属螯合物在特殊情况下能产生荧光。荧光还受外部的一些条件影响，比如温度、溶剂、PH等等

更广泛、更早使用、重现性好、仪器简单、易于掌握推广

可提供更多物理参数、样品用量少操作简便

分子发光分析法比紫外-可见分光光度法高2-4个数量级，它测定下限在0.1~0.001μg/ml

应用

都可以进行定量分析、定性分析

纯度检测、结构分析

比例测量，空白溶液作为参比确定I0，吸收池要使用相同的材料与结构以排除相同的I

属于绝对测量，无空白溶液调节，计算最后需减去空白溶液的相对荧光强度

标准曲线法，图像经过原点、直接对比法

标准曲线法图像不一定经过原点、标准对照法

I=KbcK=a或ε

吸光系数a:当浓度以g/L、厚度以cm为单位单位为L/(g*cm)

摩尔吸光系数ε：当浓度以mol/L、厚度以cm为单位单位为L/(mol*cm)

F=2.3kabI0

K=2.3kabI

偏离标准曲线

偏离朗伯—比尔定律

非单色光

溶液不均匀

浓度过高（大于0.01mol/L）

吸光物质解离、缔合或配合物组成发生变化时

一定为极稀溶液，若浓度过大分子相撞失去能量增加，发生副反应，吸光度小于0.05、激发光波长、强度液层厚度恒定。F与C成正比

分析条件

溶液极性，能溶解溶质但也要有良好的稳定性，溶剂在吸收光谱区无明