循环牵张应力下BMSCs非接触共培养对人退变纤维环细胞增殖及蛋白表达的影.pdfVIP

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循环牵张应力下BMSCs非接触共培养对人退变纤维环细胞增

殖及蛋白表达的影响

李爽;孙晓雷;马信龙;张杨;邓树才;郝永宏

【摘要】ObjectiveToinvestigatetheeffectsofdifferentcyclictensile

strainsontheproliferationandexpressionofbonemarrowstromalcells

(BMSCs)-coculturedhumandegeneratedanulusfibrosus(AF)cells.

MethodsAFcellswereisolatedfromapatientwithdegenerated

intervertebraldiscdegeneration(IVD),whichwereco-culturedwithBMSCs.

ThesolelyculturedAFcellswereusedascontrolgroup.Thetwogroupsof

cellswereexpandedinmonolayer,andcyclicallystrainedfor3hours,

whichwereapplied0,5%,10%,15%and20%strainsatafrequencyof0.25

HzusingBioDynamictestinstrument.Aflowcytometrymethodwasused

toexaminetheAFcellproliferationat24hoursfollowedtheapplicationof

cyclictensilestrains.AfterthetotalRNAwasextracted,real-timePCR

technologywasusedtodetectthegeneexpressionofcollagenⅠand

aggrecan.ResultsUnderthesameappropriatestress,theproliferative

index(PI),theproportionofcellsintheperiodofDNAsynthesis,the

expressionofcollagenⅠandaggrecanweresignificantlyhigherintheco-

culturedgroupthanthoseofcontrolgroup(P0.05).However,thebest

mechanicalstimulationwasdifferentinthetwogroups.FortheAFcells,

thepeaksofPI,theproportionofcellsintheperiodofSperiod,the

expressionofcollagenⅠandaggrecanwerefoundinthe10%straingroup,

whilefortheco-culturedcells,theywerefoundinthe15%straingroup.

ConclusionCo-culturingwithBMSCshasapositiveeffectonthe

proliferationandexpressionofhumandegenerativefibrousringcells,

whichcanprotectAFcellsfrombadstressstimulation.%目的比较不同大小

循环牵张应力对共培养状态下人退变纤维环细胞增殖与蛋白表达的影响.方法取手

术摘除的腰椎间盘突出症患者椎间盘,病理学方法对其退变程度进行分级,选取其中

退变纤维环组织.酶消化法分离纤维环细胞,选取P3代细胞,与术中获得的骨髓基质

干细胞(BMSCs)进行非接触式共培养.利用ElectroForce3200力学试验仪搭载的

BioDynamic生物反应器系统,以3h为固定时间点对其进行不同大小的频率为

0.25Hz的周期性牵张应力刺激,设置形

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