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第3章基因工程
第1节重组DNA技术的基本工具
基础巩固
1.下列关于基因工程的叙述,错误的是()
A.一种限制酶一般只能识别特定的核苷酸序列
B.基因工程所依据的原理是基因突变
C.基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的
D.基因工程能够定向地改变生物的性状,培育出新品种
答案:B
解析:基因工程依据的原理是基因重组。
2.限制酶可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ及BglⅡ的识别序列及每一种限制酶的特定切割部位。
其中切割出来的DNA片段末端可以互补结合的两种限制酶是()
A.BamHⅠ和EcoRⅠ
B.BamHⅠ和HindⅢ
C.BamHⅠ和BglⅡ
D.EcoRⅠ和HindⅢ
答案:C
解析:BamHⅠ和BglⅡ切出的黏性末端的碱基能互补配对。
3.下列关于质粒的说法,错误的是()
A.质粒存在于细菌和酵母菌等生物的细胞中
B.质粒DNA分子中每个磷酸基团都连着两个脱氧核糖
C.不同的质粒DNA中(A+G)/(T+C)的比值一定相同
D.质粒是基因工程中常用的工具酶
答案:D
4.下列关于基因工程各种工具的叙述,错误的是()
A.E.coliDNA连接酶可以“缝合”黏性末端和平末端
B.限制酶主要来自原核生物,限制酶一般不切割自身DNA
C.载体上必须有2个以上限制性内切核酸酶的切割位点
D.限制酶断开磷酸二酯键,T4DNA连接酶能恢复磷酸二酯键
答案:C
5.某线性DNA分子含有3000个碱基对(bp),先用限制酶a切割,再把得到的产物用限制酶b切割,得到的DNA片段大小如下表所示。限制酶a和限制酶b的识别序列和切割位点如下图所示。下列有关说法正确的是()
酶a切割产物(bp)
酶b再次切割产物(bp)
1600,1100,300
800,300
A.在该DNA分子中,限制酶a与限制酶b的识别序列分别有3个和2个
B.限制酶a与限制酶b切出的黏性末端不能相互连接
C.限制酶a与限制酶b切断的部位分别为磷酸二酯键和氢键
D.用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作,若干循环后,序列会明显增多
答案:D
解析:由限制酶a、限制酶b切割后产生的DNA片段可知,限制酶a的识别序列有2个,限制酶b的识别序列也有2个,限制酶a和限制酶b切出的黏性末端可进行互补配对,故可相互连接;限制酶a、限制酶b均切割磷酸二酯键。
6.下列与“DNA的粗提取与鉴定”的原理无关的是()
A.DNA分子在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同
B.DNA分子在温度超过90℃时双螺旋解聚为两条单链
C.DNA不溶于酒精溶液,但某些蛋白质溶于酒精
D.在沸水浴的条件下,DNA与二苯胺反应呈蓝色
答案:B
解析:DNA分子在温度超过90℃时,双螺旋解聚为两条单链与DNA的粗提取与鉴定无关。
能力提升
1.现有一长度为1000个碱基对(bp)的DNA分子,用限制性内切核酸酶(EcoRⅠ)酶切后得到的DNA分子仍是1000bp,用KpnⅠ单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子,用EcoRⅠ、KpnⅠ同时酶切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分子。下列能正确表示该DNA分子的酶切图谱的是()
答案:D
解析:A项所示的DNA用KpnⅠ单独酶切会得到600bp和200bp两种长度的DNA分子,不符合题意。B项所示的DNA用EcoRⅠ单独酶切会得到800bp和200bp两种长度的DNA分子,不符合题意。C项所示的DNA用EcoRⅠ酶切后得到200bp和800bp两种长度的DNA分子,不符合题意。D项所示的DNA用EcoRⅠ酶切后得到的DNA分子的长度是1000bp,用KpnⅠ单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子,用EcoRⅠ、KpnⅠ同时酶切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分子,符合题意。
2.有关下图所示黏性末端的说法,错误的是()
A.甲、乙、丙黏性末端是由不同的限制性内切核酸酶酶切产生的
B.甲、乙具有相同的黏性末端,可相互连接,甲、丙之间不能
C.DNA连接酶的作用位点在b处,催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键
D.切割甲的限制性内切核酸酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子
答案:C
解析:甲、乙黏性末端可相互连接,但甲、丙之间不能相互连接。DNA连接酶作用位点在a处,催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键。切割甲的限制性内切核酸酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子。
3.下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别序列,AmpR表示青霉素抗性基因,TetR表示四环素
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