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第2节基因工程的基本操作程序（第1课时）
学习目标
1.运用系统思想解释基因工程的基本步骤和原理（生命观念）
2.结合资料和示意图阐明PCR的原理，说出PCR所需的条件及其反应过程（科学思维）
3.结合模式图说出基因表达载体的组成，并理解构建目的（生命观念、科学思维）
课前自主探究
一、目的基因的筛选与获取
1．目的基因
(1)概念：用于改变或获得等的基因。
(2)实例：培养转基因抗虫棉用到的目的基因是。
2．筛选合适的目的基因
(1)较为有效的方法：从相关的和的基因中进行
筛选。
(2)实例：在培育转基因抗虫棉之前，科学家不仅掌握了Bt基因的，
也对Bt基因的表达产物——有了较为深入的了解。
(3)认识基因结构和功能的技术方法：技术、数据库、工具。
3．利用PCR获取和扩增目的基因
(1)PCR的含义：PCR是的缩写，它是一项根据的原理，
在体外提供的各种组分与反应条件，对进行大量复制的
技术。
(2)原理：
(3)条件：
参与的组分在DNA复制中的作用
解旋酶(体外用代替)打开DNA双链
DNA母链提供的模板
合成DNA子链的原料
催化合成DNA子链
使能够从引物的端开始连
引物
接
维持反应体系pH稳定
（4）过程：PCR过程包括三步（填图）
(5)结果：每次循环后目的基因的量增加一倍，即成形式扩增(约为，
其中n为数)。
提醒：
①在PCR过程中实际加入的为dNTP(即dATP、dGTP、dTTP、dCTP)，既可作为合成DNA子链的
原料，又可为DNA的合成提供能量。
②引物既可以是DNA单链，也可以为RNA单链。细胞内的DNA进行复制时，也需要引物，一
般为RNA片段。
2＋2
③真核细胞和细菌的DNA聚合酶都需要Mg激活。因此，PCR反应缓冲溶液中一般要添加Mg
＋。
二、基因表达载体的构建——核心
1．构建基因表达载体的目的
(1)使目的基因在受体细胞中，并且可以给下一代。
(2)使目的基因能够和发挥作用。
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