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监测方法沉降法重力沉降(平板沉降法)静电沉降热沉降12345撞击式空气微生物采样法离心式空气微生物采样法洗刷式空气微生物采样法过滤空气微生物采样法温差空气微生物采样法静电或冲击空气微生物采样法浮游菌测定法采样时,必须有2次空白对照第1次对用于检测的培养皿或培养基条做对比试验每一批做一个对照皿第2次是在检测时,每区或每室1个对照皿对操作试验做对照试验模拟操作过程但培养皿或培养基条打开后又迅速封盖两次对照试验都必须为阴性整个操作过程都必须无菌操作未采用洁净技术净化空气的房间暴露5min采用洁净技术净化空气的房间暴露30min未采用洁净技术净化空气的房间采用洁净技术净化空气的房间暴露30min、Ⅳ类环境暴露5min类环境暴露15min010203040506采样后盖好平皿盖子01记录采样时间02采样平皿6h内送实验室培养03置36±1℃恒温培养箱培养48h04计数每个平板的菌落总数05若怀疑与医院感染有关时06进行目标微生物检测07布点应尽量避开高效送风口正下方放置培养皿时应从最里面的房间或房间的最里面开始布点依次向外最后人员撤出收集培养皿时从最外面的房间或房间的最外面开始最先布的点最后收采样前关闭门窗无人走动的情况下静止10分钟后采样平板暴露法采样注意事项:215着无菌的工作服、戴口罩、帽子操作前洗手或手卫生手臂及头部不可越过打开的培养皿上方所带物品徐清洁后方可带入4每次采样人员不得超过2人3行动及放置动作要轻尽量减少对空气流动状态的影响对检测人员的要求:结果计算奥梅良斯基公式(奥氏公式):5分钟在100cm2的面积上降落的细菌数相当于10L空气中所含的细菌数细菌数(cfu/m3)=50000NAtt-------平皿暴露于空气中的时间(分钟)N-------培养后,平皿上的细菌总数A-------所用平皿的面积(2002版消毒技术规范)2011年《消毒技术规范》0102平板暴露法放置平皿5个放置15min培养后5个平皿共长菌落15个该产房空气培养的结果为平均每皿的菌落数3cfu/皿·15min按平均每皿的菌落数报告:cfu/皿·暴露时间例如:产房≥30m2空气采样器法(浮游菌测定法)二级撞击式空气采样仪六级撞击式空气采样仪八级撞击式空气采样仪6层有微小孔眼的铝合金圆盘圆盘下放琼脂平皿圆盘间有密封胶圈通过三个弹簧卡子把圆盘固定联在一起标准采样流量为1立方尺28.3L/min推荐使用六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器☆提前联系需采样的科室安排好采样的时间以及房间的准备百级洁净房间至少已运行15分钟其余洁净度房间至少已运行40分钟空气采样仪(浮游法)采样步骤和方法☆采样仪需提前充电10小时☆采样点:洁净房间每间需要采样至少2个点一次采样需要2个空白对照☆采样的布点:中央区和周边区房间大于10m2每增加10m2增设一个采样点在平皿上要标注房间号和采样区域及采样时间?☆采样的高度:将采样器置于室内中央0.8m~1.5m高度☆采样的角度:在100级区域检测时,采样口应对着气流方向在其他级别区域检测时,采样口均向上☆采样的时长:百级中央区30分钟其余洁净房间均为10分钟(至少2分钟)采样时间不应超过30min操作者:带口罩、帽子,穿隔离衣换鞋或穿鞋套;手卫生
安装进气盖前需用酒精灯灭菌进气端盖正反两面采样时要注意无菌操作:空白对照1:培养皿不打开空白对照2:模拟操作过程但培养皿打开后又立封盖两次对照必须均为阴性。空白对照的设置:被测区域洁净度级别最小采样量m3(L)100级0.6(600)
1000级0.06(60)
10000级0.03(30)
100000级0.006(6)300000级0.006(6)1浮游菌法最小采样量2培养皿的准备要求配置平皿的试验台
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