4-2.1生物选修1课堂教学-微生物的实验室培养课件.pptVIP

课题1——微生物的实验室培养;主要内容;病毒与亚病毒

原核微生物

真核微生物

;真病毒（Euvirus）;病毒几乎可以感染所有的细胞生物，并具有宿主特异性;病毒;微生物类群基本知识;细菌细胞壁的功能：;细菌的原生质体(protoplast);细菌细胞膜的生理功能;核糖体

贮藏物

多种酶类和中间代谢物

质粒

各种营养物和大分子的单体等;真核微生物;蕈菌广泛分布于地球各处，在森林落叶地更为丰富。;榆黄菇;培养基;一、选用和设计培养基的原则

1.目的明确;微生物细胞组成元素的调查或分析，是设计培养基时的重要参考依据。;营养物质的浓度适宜；

营养物质之间的配比适宜；;3.理化适宜;pH;培养基;二、培养基的种类;（一）按对培养基成分的了解作分类;（二）按培养基外观的物理状态作分类;（三）按培养基对微生物的功能作分类;天然培养基;天然培养基的优点：

营养丰富、种类多样、配制方便、价格低廉。

缺点：

是成分不清楚、不稳定，不适宜做精细的科学实验。;组合培养基;组合培养基的优点：

成分精确、重演性高。

缺点：

价格较贵、配制较烦，且微生物生长比较一般。;液体培养基（liquidmedia）;固体培养基（solidmedia）;半固体培养基（semi-solidmedia）;一般可在液体培养基中加入0.5％左右的琼脂制成。;固体培养基中凝固剂必须具有的特点：

a.不被微生物液化、分解和利用

b.在微生物生长的范围内保持固体状态

c.凝固点的温度对微生物无害

d.不因消毒灭菌的高温处理而破坏

e.配制方便、价格低廉

f.透明度好、粘着力强;常用的凝固剂：

琼脂（agar）、

明胶（gelatin）、

海藻酸钠（alginate）、

脱乙酰吉兰糖胶（Gelrite）、

多聚醇F127（pluronicpolyolF127）等。;基础培养基（minimummedia）;加富培养基（enrichedmedia）;增殖培养基（completemedia）;选择性培养基（selectedmedia）;鉴别性培养基（differentialmedia）;三、培养基的配制;菌落;4-2.1生物选修1课堂教学-微生物的实验室培养;4-2.1生物选修1课堂教学-微生物的实验室培养;;菌落;菌落;酵母菌;无菌技术的概念：无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。

日常的生活环境中，???时每刻每处都存在着微生物，任何一个不经意的动作都可能将某种微生物引入到培养物中。在具备无菌环境和获得无菌材料后，还要始终保持无菌状态，才能对某种特定的已知微生物进行研究或利用它们的功能，否则外界的各种微生物很容易混入。;外界不相干的微生物混入的现象，在微生物学叫做污染杂菌。防止污染是微生物学工作中十分关键的技术，彻底灭菌和防止污染是无菌技术的两个方面。

此外，要有效避免操作者自身被微生物感染，还要防止所研究的微生物，特别是致病微生物或经过基因工程改造了的本来自然界不存在的微生物从我们的实验容器中逃逸到外界环境中去（生物安全）。;消毒与灭菌的概念：

（1）培养细菌用的培养基与培养皿（需要灭菌）

（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（需要灭菌）

（3）实验操作者的双手（需要消毒）

（4）接种环、针、涂布棒：灼烧灭菌（外焰）。;消毒：指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。

灭菌：指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子。;消毒的方法：;灭菌的方法：;无菌技术;倒平板：

（1）灭菌后，培养基冷却到55℃后应及时进行倒平板操作；每个72mm培养皿需要培养基12～15ml。

（2）为什么要使锥形瓶的瓶口通过火焰？

答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。;倒平板：

（3）平板冷凝后，为什么要将平板倒置？

答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。

（4）在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？

答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。;平板划线;平板划线

（1）为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？

答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线