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我我国国急急性性⽩⽩⾎⾎病病免免疫疫分分型型的的四四⾊⾊⽅⽅案案
中国流式细胞术急性⽩⾎病免疫分型四⾊⽅案
由于多参数流式细胞术(MFC)免疫分型具有客观敏感准确等特点,免疫表型已成为诊断急性⽩⾎病的重要依据之⼀。因准
确的诊断需要选择⼀定数量的抗体,涉及多个造⾎系列的抗原。但⽬前国内甚⾄国际上没有规范化的⽅案可以借鉴。⽽国内不
同的医疗单位所⽤的抗体数量和种类均有较⼤的异质性,有些单位由于应⽤的抗体数量较少或抗体选择不当,影响对疾病的诊
断分期和预后的判断。鉴于国内的实际情况,中国免疫学会⾎液免疫分会临床流式细胞术学组经过多次的讨论,提出以
CD45/SSC为基础的中国流式细胞术急性⽩⾎病免疫分型四⾊⽅案,供参考。本⽅案不包括标本的采集保存制备试剂和
仪器的调整及急性⽩⾎病的诊断标准,这些对免疫分型同样重要,可参考相应的指南。
1.适应范围:
1.1急性淋巴细胞⽩⾎病(ALL):
zB系:早B前体-ALL(Pro-B),普通-B-ALL(Common-B),前体B-ALL(Pre-B),及与Burkitt淋巴瘤进⾏鉴别
zT系:早T前体-ALL(Pro-T),前体T-ALL(Pre-T),⽪质-T-ALL和髓质-T-ALL.
1.急性早幼粒细胞⽩⾎病(APL)
1.3急性髓细胞⽩⾎病(AML)
zAML微分化型(AML-M0)
zAML伴粒系和单核细胞分化型(AML-M1/和AML-M4/5)
z急性红⽩⾎病(AML-M6)
z急性巨核细胞⽩⾎病(AML-M7)
1.4前体树突细胞肿瘤
1.5急性嗜碱性粒细胞和肥⼤细胞⽩⾎病
1.6混合表型⽩⾎病
1.7对上诉急性⽩⾎病治疗后检测MRD的标志进⾏筛查
.抗体的选择:根据检测的⽬的,需要检测不同的抗体:
.1鉴别急性慢性⽩⾎病:对于急性髓细胞⽩⾎病,可以根据CD45/SSC图型进
⾏初步判断。髓系⽩⾎病细胞CD45的表达较弱,往往位于正常淋巴细胞下⽅,且多数⽩⾎病细胞SSC较低(除去⼤颗粒APL
患者)。再根据CD34CD117CD38HLA-DRCD13的表达进⾏判断。急性髓系⽩⾎病细胞多数表达这些标志或只表
达这些标志中的部分标志。对于淋系⽩⾎病细胞的鉴别,可以根据CD34TDTCD10,cuK/LcCD3CD1a(CD99)
的表达进⾏判断。如果B淋巴细胞表达CD34和或TDT,则说明为幼稚B细胞。CD10在B-ALL中表达较普遍在部分T-ALL中也为
阳性,但在Burkitt淋巴瘤,滤泡性淋巴瘤(FL)弥漫⼤B淋巴瘤(DLBCL)和B细胞淋巴瘤未分类型(BCLU)经常为阳性,这些均
为周围型淋巴瘤,不表达CD34和TDT。因此,在CD10+及CD34和或TDT阴性时,则需要检测cuK/L鉴别成熟或幼稚B细
胞,成熟B细胞应该表达膜免疫球蛋⽩(Ig及膜轻链Kappa和lambdaL)。
.鉴别⽩⾎病细胞的系列来源:髓系及淋系(BT和NK)。可参考008年WHO
⾎液和淋巴系统肿瘤分类中提出的标准。对于B系肿瘤细胞,在幼稚细胞⽐例较
低时,还应该与正常的B组细胞进⾏鉴别。这些正常B祖细胞在婴⼉,⼉童
期⽐例较⾼,在成⼈中⼀般⽐例较低,但在淋巴瘤免疫性疾病,HIV感染
者化疗和造⾎⼲细胞移植后可出现较⾼⽐例的B祖细胞,此时应结合临床
及免疫表型特点加以鉴别。其鉴别要点,参考MRD检测中LAIP的表型特
征。
表1鉴别⽩⾎病的系列性及需要检测的抗体
髓系:
MPO+(FCM免疫组化或细胞化学)
或单核细胞分化(⾄少个标志:NSECD11cCD64CD14溶菌酶)
T系:
cCD3(FCM应⽤抗ε抗体。⽽免疫组化使⽤的多克隆抗体可与CD3ζ链结合,⾮T细胞
特异的。
或膜CD3(很少表达)
B系:
强CD19和CD79acCDCD10中⾄少⼀个标志强表达
或弱CD19和CD79acCDCD10中⾄少⼆个标志强表达
.3确定⽩⾎病的亚型,⽩⾎病的亚型在⼀定程度上反应⽩⾎病的分化阶段性,
关于正常细胞的不同分化阶段抗原表达的特点,已有发表的⽂章参考,在此
不再详细赘述了。根据正常细胞的分化规律,WHO提出了对于B-ALL和T-ALL
亚型的分类标准(表,3),但国际上仍有不同的观点,有学者认为其与预后⽆明显相
关性,且其分型抗原的科学性有待研究。另外,⼀些关键性标志,例如CD79a,CD
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