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临床基础检验学
实验一
;实验一、白细胞计数
;器材
改良牛鲍血细胞计数板及专用盖片、微量吸管、带孔吸头、1ML刻度移液管、小试管、洁净软纱布、干棉球、光学显微镜。
;2021/3/29星期一;2021/3/29星期一;毛细血管采血标准操作程序;4紧捏刺血部位,使其自然充血。
5用无菌刺针穿刺取血,动作应迅速,深度2~3mm,稍加挤压以血液流出为宜。
6用干棉球擦去第一滴血。
7按需要依次采血。
8采血完毕,用干棉球压住伤口,止血片刻。;微量吸管的使用;3.操作步骤
(1)加稀释液用移液管向小试管内加入0.38ml白细胞稀释液。
(2)采血、稀释用微量吸管采血20ul,拭去管外余血,释放于小试管底部,用上部稀释液洗净吸管内余血,轻摇试管混匀,静置等其溶血。
(3)清洁计数板及盖片(动作轻柔),夹持盖片缘纵向前推轻放于两侧支持堤上。
(4)充计数池将小试管轻微振荡2min,立即以一次性微量吸管吸取混匀后的白细胞悬液,充入计数池内。静置2-3min,使细胞沉于计数池底面。
(5)调试显微镜将计数板放置载物台上,选择(4×)低倍镜,调节聚光器使光线较暗,调节旋钮找到方格线,转至低倍镜(10×),调节光亮。
(6)计数低倍镜下计数四角4个大方格内白细胞总数,压线细胞数上不数下,数左不数右。;2021/3/29星期一;血细胞计数板的方格;结果计算
白细胞总数=4大格白细胞数(N)/4×10×20×106
=N÷20×109/L
用△.△×109/L(小数点后一位)表示
;注意事项
;5.注意事项;(6).一些贫血患者血液中有核红细胞增多,会计数在白细胞总数内,应校正。
校正公式:白细胞校正数/L=M×(100/100+N)
M为未校正前白细胞数,N为在白细胞分类时,计数100个白细胞的同时计数到的有核红细胞数。
(7).调试显微镜
将血细胞计数板平放于载物台,低倍镜处所充计数池正中盖片略上方,向下微调载物台(防止压碎盖片)至看清计数区域内分隔线条为止。
;6.细胞计数原则;7.正常参考值
成人:(4.0-10.0)×109/L
新生儿:(15.0-20.0)×109/L
;8.考核评价
a.常规考核标准(RCS)
RCS=×100%
评价:白细胞≤4.0×109/L者,RCS<30%
白细胞在(4.1-14.9)×109/L者RCS<20%
白细胞≥15.0×109/L者RCS<15%
超过上述标准者为不合格
b.其他方法;9.思考题;实验报告内容
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