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血清直接胆红素(D-BIL)测定
1.实验原理
直接胆红素与2,4-二氯苯胺重氮盐形成重氮化合物,在酸性条件下呈红色。
2.标本:
2.1病人准备:无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。
2.2类型:血清、肝素或EDTA血浆,应避光保存。
3.标本存放:15~25℃保存可稳定2天;2~8℃保存可稳定7天;-20℃保存可稳定3个月,如冰冻保存,不
可反复冻融!。
4.标本运输:常温条件下避光保存运输。
5.标本拒收标准:标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。
6.实验材料
6.1试剂:申能总胆红素试剂盒:14108271701试剂+试剂2
6.1.1试剂组成
试剂1:16×64ml
EDTA-Na0.07mmol/L
2
氯化钠6.6g/L
氨基磺酸70mmol/L
试剂2:6×16ml
2,4-二氯苯胺重氮盐0.09mmol/L
盐酸130mmol/L
EDTA-Na0.02mmol/L
2
6.1.2试剂准备:试剂为即用式。
6.1.3试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。
试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻。
6.1.4变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。
6.1.5注意事项:此试剂为体外诊断用。警告!腐蚀剂!不要入口。避免和眼睛,皮肤或衣服接触。如果
接触到,立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。接触到眼睛或吞服,立即寻找医疗保护。
6.2校准品:使用DiaSys公司提供的TruCalU校准品对自动分析仪进行校准,参见生化检验校
准品和质控品.SOP文件
6.3质控品:参见生化检验校准品和质控品.SOP文件
7.仪器:奥林巴斯AU680生化分析仪
8.操作步骤
8.1项目基本参数:参见生化检验贝克曼AU680生化分析仪项目测定参数.SOP文件
8.2仪器操作步骤:参见生化检验贝克曼AU680生化分析仪操作规程.SOP文件
检验结果的判断与分析
10.质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告
限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
11.计算方法以TruCalU复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报
告可靠的检测结果无需手工计算,以μmol/L报告。手工测定计算方法为:
△Au
直接胆红素(μmol/L)=×校准液浓度
△As
12.参考值范围:≤6.8mol/L
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己
的参考值。
13.临床意义:胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强,几乎不溶解于水。在血液中与白
蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中,胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯
由胆管排入肠道。
溶血(肝前黄疸)、实质的肝损伤(肝性黄疸)和胆管堵塞(肝后黄疸)都会导致血液胆红素增高,形
成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症,称为Gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞
后以及出生后红细胞破碎增多,使60~70%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总
胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素,因此可以根据总胆红素和直接胆
红素的差来估计游离胆红素的含量。
14.操作性能
14.1线性范围:1.7~171mol/L
5
14.2精密度:精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法,AU680批内精密度小于4%或SD≤0.04,总精密度
小于5%或SD≤0.07。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。
批内精密度xs
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