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等电点
;一、蛋白质的两性电离及等电点;电泳:带电颗粒在电场力的作用下向着与其电荷相反的电极移动的现象。;蛋白质分子电泳;A:染色后显示的蛋白质区带
B:光密度扫描定量分析;沉淀
;(一)蛋白质的沉淀;;能沉淀各类生物碱的化学试剂叫做生物碱试剂。
如:单宁酸、苦味酸、钼酸、钨酸、三氯乙酸能沉淀各类生物碱;1.分离制备有活性的天然蛋白制品
2.从制品中除去杂蛋白,或者制备失去活性的蛋白质制品;(二)蛋白质的凝固作用
蛋白质变性后的絮状物加热可变成比较坚固的凝块,此凝块不易再溶于强酸和强碱中。;变性
;蛋白质的变性、显色和紫外反应;1.理化性质发生了变化,易发生凝集、沉淀
2.生化性质发生了变化,更容易被蛋白酶水解
3.生物活性丧失,这是蛋白质变性的最重要标志之一;当蛋白质变性程度较轻时,如果去除变性因素,有的蛋白质仍能恢复或部分恢复其原来的构象及功能,这种变化称为复性;天然状态,有催化活性;应用举例
临床医学上,变性因素常被应用来消毒及灭菌。
此外,防止蛋白质变性也是有效保存蛋白质制剂(如疫苗等)的必要条件。;2019年口腔执业助理医师《生物化学》考试大纲;点滴积累
1.蛋白质两性解离、胶体性质、沉淀、变性、紫外吸收及颜色反应均与蛋白质的化学组成及结构密切相关。
2.蛋白质两性解离状态主要取决于蛋白质分子中酸性和碱性基团数量及酸、碱基团解离度的大小;同时亦受蛋白质溶液pH的影响。pI只是蛋白质解离的一种特例状态而以。
3.实践中常运用蛋白质的pI和其所处溶液的pH来判断蛋白质带电性质及荷电多少。可根据pI-pH的差来推论蛋白质电荷性质,其差值为正蛋白质带正电荷,反之亦然;差值越大,荷电数量则越多。;4.蛋白质的变性仅导致蛋白质特定的空间结构被破坏不涉及蛋白质一级结构。绝大多数蛋白质的变性是不可逆的。
5.蛋白质溶液稳定因素为蛋白质颗粒表面的同种电荷和水化膜。蛋白质沉淀机制就是破坏两个稳定因素,使蛋白质颗粒聚集而沉淀。
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