酶—影响酶促反应的因素(生物化学课件).pptx

pH

;pH对酶反应速度的影响;pH对酶促反应速度的影响，是因为pH改变了酶分子中必需基团的解离状态，因此影响到活性中心的空间构象，进而影响酶的活性。此外底物和辅酶的解离状态也受环境pH的影响，从而影响酶与底物的结合，影响酶发挥催化作用;不同酶的最适pH;一些酶的最适pH值;1、在做体外实验时，必须在反应液中加入足量的适宜缓冲液，以维持反应体系中pH不发生显著变化。

2、使用酶类药物时，要注意pH的影响，如胃蛋白酶就和稀盐酸配合使用，不能和碱液（小苏打）混用。

;底物浓度

;在其他因素不变的情况下，底物浓度对反应速度的影响呈矩形双曲线关系。;在酶促反应中产物的生成量与ES复合物的浓度呈正比。当底物浓度很低时，酶的活性中心没有全部与底物结合，增加底物浓度，由于中间产物生成增多，产物的生成也增加，故反应速度加快。当底物浓度增高到一定浓度时，酶的活性中心已被底物饱和，此时再增加底物浓度，中间产物不再增加，反应速度趋于恒定。;1913年前后Michaelis和Menten对底物浓度与酶促反应速度的关系做了研究，推导出酶促反应的基本公式，称米氏方程式。;（二）Km与Vm是重要的酶促反应动力学参数;

2.Km意义：

（1）Km是酶的特征性常数之一，Km只与酶的结构、催化的底物及反应环境（如pH、温度）有关,与酶的浓度无关。可判定催化同一化学反应的酶是同工酶还是同一种酶。

（2）Km可近似表示酶对底物的亲和力（反比），同一酶对于不同底物有不同的Km值。可确定酶催化的最适底物或天然底物。;激活剂

;激活剂(A)对反应速度的影响;酶浓度

;酶促反应的速度常常是在一定的条件下，在规定的时间内，测定其底物消耗量或产物的生成量来表示，即用反应系统中产物的生成量（或底物的消耗量）对反应时间的变化率来表示。

影响因素包括：考点

底物浓度、酶浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂等。

※研究一种因素的影响时，其余各因素需恒定。;酶促反应速度取其初速度，即底物的消耗量很小（一般在5﹪以内）时的反应速度。;酶浓度对反应速度的影响;温度

;温度对酶促反应速度存在两方面的影响。升高温度一方面使酶促反应速度加快；同时也使酶蛋白变性加速，使反应速度减慢。综合这两方面因素，使酶促反应速度最快时的环境温度称为酶的最适温度。温血动物体内酶的最适温度多在35-40℃之间。

;此酶是从水生栖热菌ThermusAquaticus（Taq）中分离出的热稳定性DNA聚合酶，用于PCR反应。;(1)酶在干燥状态下，耐温度变化的能力较强，故一般酶制剂为干粉状。

(2)低温使酶的活性降低但并不使酶破坏。温度回升后，酶又能恢复活性。因此可以利用低温贮存生物制品、菌种等。临床上的低温麻醉减少组织细胞的代谢程度，使机体耐受手术时氧和营养物质的缺乏。

(3)高温使酶变性失活后，即使再降低温度，酶的活性也不能恢复，高温灭菌就基于此原理。