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黄孢原毛平革菌降解白沙蒿种子粘液物质的过程分析*
中文摘要
*种子粘液在植物关键生活史阶段发挥着重要的生态作用。白沙蒿(Artemisia
sphaerocephala)是中国西北荒漠地区重要的固沙先锋植物,种子具有典型的粘液层,主
要成分是多糖类物质。前期研究表明,生境土壤中的黄孢原毛平革菌(Phanerochaete
chrysosporium)可以降解白沙蒿种子粘液物质,但粘液的降解过程仍不清楚。基于此,
本研究进一步测定了黄孢原毛平革菌的生长特性、产铁载体能力、解钾能力、溶无机磷
能力和溶有机磷能力,并研究了温度、pH、菌液浓度和粘液量及降解时间对黄孢原毛平
革菌降解种子粘液物质的影响,最后通过液质联用法对黄孢原毛平革菌降解种子粘液物
质产物进行了测定和分析。本研究可以洞悉种子粘液物质的微生物降解机理,进而揭示
荒漠植物粘液种子的生态适应机制。主要研究结果如下:
(1)黄孢原毛平革菌在固体培养基上生长时,1-6d为快速增长的营养期,6d之后
生长趋于稳定,进入繁殖期,形成了白色的粉末状孢子,铺满整个平板。在液体培养基
上生长时,1-5d为快速增长的营养期,5d之后生长趋于稳定,进入菌株繁殖期,在摇
瓶中形成了白色的菌丝团,直径大小约为1-2mm。
(2)通过测定液体摇瓶培养下的降解酶活性,发现主要降解酶的活性与菌株生长
之间的相关性并不一致。三种主要降解酶的活性最高值也不同时出现。木质素过氧化物
酶(LiP)活性在第5d达到最高值,为2.32±0.08U;锰过氧化物酶(MnP)活性在第3
d达到最高值,为124.92±1.95U;漆酶(Lac)活性在第9d达到最高,为2.5±0.34U。
(3)观察到黄孢原毛平革菌产生了红色的铁载体晕圈,透明的解钾晕圈、溶无机
磷晕圈及溶有机磷晕圈,并且晕圈与菌圈直径比D/d随培养时间增加逐渐增大,表明黄
孢原毛平革菌具有产铁载体能力、解钾能力、溶无机磷能力和溶有机磷能力。
(4)黄孢原毛平革菌降解种子粘液物质的最优条件为温度30℃、pH4.5、菌液量
10mL、粘液量1.0g。在此条件下,有菌有粘液处理最终降解率达到了93.04±4.87%,
根据可重复测量方差分析结果,有菌有粘液处理组与其它处理组在菌体干重、LiP、MnP
*本研究得到国家自然科学基金面上项目(批准号)资助。
和Lac降解酶活性上均具有显著差异。
(5)由主成分分析和正交偏最小二乘法判别分析,得出有菌有粘液与对照两组之
间具有显著差异。两组之间共有300种代谢物差异显著,291种显著上调表达,9种显
著下调表达。在变量重要度投影(VIP≥1)的前20种差异代谢物中,糠醛显著下调表
达,其余代谢物均显著上调表达,包括3种有机氧化物类、4种脂类和类脂分子、2种
苯丙素和聚酮类和1种有机酸类。根据KEGG(KyotoEncyclopediaofGenesandGenomes)
通路富集分析,发现影响最显著的通路是缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成途径。
本文研究了黄孢原毛平革菌的基本特性,探索了环境条件对黄孢原毛平革菌降解种
子粘液物质过程的影响,解析了对降解过程的产物,从而比较全面的揭示了黄孢原毛平
革菌降解种子粘液物质的机理,这将有助于我们深入了解荒漠植物种子粘液物质的生态
功能和植物-微生物的互作机制。
关键词:种子粘液物质;降解条件;降解产物;生长特性;非靶代谢组学
ThedegradationprocessofseedmucilageofArtemisia
sphaerocephalabyPhanerochaetechrysosporium*
ABSTRACT
Seedmucilageplaysanimportantecologicalroleinkeylifehistorystagesofplants.
Artemisiasphaerocephalaisanimportantpioneerplantforsandfixationinthedesertare
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