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基于AP2和AG基因对斑果藤花瓣缺失机制的初步探究
中文摘要
StixisLour.Resedaceae
斑果藤属()是木犀草科()多年生木质藤本,为东南亚特有
属,大多分布在我国云南。斑果藤属的近缘类群节蒴木科和木犀草科均有花瓣,但是该
属植物花瓣缺失,使得斑果藤属成为花发育研究的理想材料。
StixissuaveolensBorthwickiatrifoliata
本研究首先对斑果藤()和节蒴木()幼嫩花
进行体视解剖对比观察,结果发现斑果藤在本该着生花瓣的位置无花瓣,而是有一定的
空隙,为了进一步确定该位置是否产生花瓣原基,本研究采用石蜡切片技术对斑果藤幼
嫩花芽进行观察,结果显示斑果藤花萼与雄蕊间的空隙处只有薄壁细胞,无分生组织,
无维管束延伸,不具备分化、继续发育的能力,由此判断,斑果藤花缺失的原因是花瓣
原基不存在。其次,我们对斑果藤不同发育时期的花及叶进行转录组测序,得到了花发
育相关基因的转录本序列。结果发现,ABC三类花基因均有表达。为确定花发育基因
的表达模式,我们采用半定量RT-PCR技术对AP2、AP3、PI和AG基因进行PCR扩增,
AP2AP3PI
结果表明,基因在花萼中表达,、基因在雄蕊中表达,这与花发育模型相一
AG
致;但是基因在萼片和雄蕊中均有表达,暗示其表达范围可能发生外扩,这可能是
斑果藤花瓣缺失的重要原因。为了进一步从基因结构上探究花瓣缺失的机制,我们从斑
果藤中克隆了A类功能基因AP2和C类功能基因AG,并对其编码区序列进行了生物信
AP2YRGRAYD
息学分析,基因多序列比对结果显示,两个保守元件中元件高度保守,
263277AGAG
元件在、位氨基酸发生突变,推测与基因间的相互作用有关;基因的多
序列比对结果显示,MADS-box保守结构域在141、154位氨基酸突变,K-box保守结构
域195、245、256位氨基酸发生突变,推测其可能与AG基因表达范围异常有关。为了
AGAGpCambia
验证基因对斑果藤花发育的影响,我们构建了拟南芥基因表达载体
2301-AG。
本研究基于斑果藤转录组数据,对AP2和AG基因进行表达范围分析、编码区生物
信息学分析和载体构建,初步探究了斑果藤属花瓣缺失的原因,为进一步探究斑果藤花
I
瓣缺失的机制奠定了基础,也为被子植物花发育的研究提供了数据。
关键词:斑果藤花发育AP2基因AG基因
II
APreliminaryStudyontheMechanismofPetalDeletioninStixis
sauveolens--BasedonAP2andAGGenes
ABSTRACT
StixisLour.isperennialwoodyvineinResedaceae,itisuniqueinSoutheastAsia,mostly
distributedinYunnaninourcountry.TherelatedgroupsofgenusBorthwickiaceaeand
ResedaceaeofStixisbothhavepetals
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