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二氧化氯对洋葱细菌性软腐病的防控研究

中文摘要

洋葱（AllumcepaL.）因其独特的生物活性化合物，如黄酮类，花青素，具有补充

营养及促进健康的特性，是具有营养价值的蔬菜之一。洋葱易受到病原菌的侵染，导

致品质劣变。由克雷伯氏杆菌（Klebsiellapneumoniae）引起的软腐病是洋葱主要细菌

性病害。软腐病的传统防治方法是使用硫磺粉等杀菌剂。尽管杀菌剂已被证明可以有

效地抑制贮藏期软腐病，但多数的化学杀菌剂仍会造成严重的食品安全问题。因此，

本研究以软腐的洋葱为试验材料，首先从软腐的洋葱中分离出两株病原菌，经形态学

观察、柯赫法则验证和16SrDNA技术进行鉴定，再对病原菌的生物学特性进行分析；

确定病原菌后，探究ClO对病原菌体外抑菌效果和抑菌作用机理，最后将ClO应用到

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接菌的洋葱中，对洋葱鳞茎的硬度、色差、重量和酶活力进行测定。实验结果如下：

（1）从洋葱软腐组织中分离出两株病原细菌RF-1和RF-2，经微观形态的观察、生

化学测试和16SrDNA技术鉴定，确定病原菌RF-1和RF-2为皮特不动杆菌

（Acinetobacterpittii）和克雷伯氏杆菌（Klebsiellapneumoniae）。对病原菌的生物学特

性进行研究，发现病原菌RF-1和RF-2的最适生长温度分别为34℃和32℃；最适接种

量分别为2.0%和1.5%；最适pH值为7.0；最适碳源为葡萄糖；最适氮源为酪蛋白胨。

（2）以洋葱采后两株致病细菌为指示菌，由抑菌圈结果、最低抑菌浓度（MIC）和

最低杀菌浓度（MBC）、抑菌生长曲线和致死曲线可知，添加ClO溶液能够使两株病

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原菌的生长受到不同程度的抑制，且ClO浓度越高，细菌存活数越低。细胞膜的通透

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性实验结果表明，经ClO处理后能明显观察到病原菌RF-1和RF-2的生长和繁殖能力

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受到抑制，且细胞壁和细胞膜上的负电荷分布不均匀造成变形，发生物理性破裂，使

细胞的内容物如水、蛋白质等渗出体外，发生“溶菌”现象而死亡。因此，ClO可以

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改变细胞膜的通透性，使细胞内核酸、蛋白质等物质泄漏；同时，未经ClO处理的菌

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株RF-1和RF-2，红色荧光很少，说明细胞膜较完整；经过ClO处理后的细菌，红色

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荧光的细菌数明显增加，且ClO浓度越大，红色荧光的细菌数越多，说明细胞膜不完

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整，ClO对菌株RF-1和RF-2的细胞膜具有一定的破坏作用。探究病原菌经ClO处理

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后其果胶酶和纤维素酶活性的影响发现；经过ClO处理的菌株RF-1和RF-2果胶酶和

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纤维素酶活性明显降低，说明ClO对菌株RF-1和RF-2的果胶酶和纤维素酶活性具有

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一定的抑制作用。

（3）洋葱片贮藏实验结果表明，ClO可以延缓洋葱腐烂，对病原菌有抑制作用，且

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其抑制作用会随着贮藏时间的延长减弱。贮藏整茎洋葱实验发现，未经ClO处理的洋