生物浙科版学案：预习导航实验6α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测.docxVIP

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一、酶与固定化酶

1．酶：活细胞产生的具有催化作用的一类有机物，它是生物体内各种化学反应的催化剂。

2．固定化酶：将________的酶用________或________方法________，使之成为________而又有________。

3．将酶改造成固定化酶的原因是:

由于酶________，且不利于________，所以要将酶改造成固定化酶.

4．酶固定化的方法有：

________法、________法、________法和________法等。本实验用的是________法。

5．固定化酶作用的机理：

将固定化酶________，当________时，在________的作用下________.

答案：2。水溶性物理化学固定在某种介质上不溶于水酶活性的制剂

3．在水溶液中很不稳定工业化使用

4．吸附共价偶联交联包埋吸附

5．装柱底物经过该柱酶转变为产物

二、淀粉水解的过程及其在淀粉指示剂下的颜色反应：

答案：糊精蓝红不显

三、α.淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测的实验

1．实验目的：

(1)制备________。

(2）进行________的测试。

2．实验原理：

将________酶固定在________上,一定浓度的淀粉溶液经过________后,可使淀粉水解成________.用________测试，若流出物呈________色，表明有________生成。

3．本实验使用的酶及特性：

本实验使用的酶是________酶，其作用的最适宜pH为________，最适宜温度为________。

4．实验设备及用品：

5mL塑料注射器、50mL烧杯、滴管、自行车用气门芯及夹子、注射器架、试管或微量离心管3支。

5．实验材料及其制备：

（1）材料：固定化的α.淀粉酶、可溶性淀粉酶、5mol/LKI—I2溶液。

（2）部分材料的制备:

▲α。淀粉酶的固定化：

在烧杯中将5mg________溶于4mL蒸馏水中

(由于________,可能有些不溶物)

↓

再加入5g________,不时搅拌30min

↓

30min后将上述溶液装入1支注射器中

（该注射器的下端接有________并用________封住）

石英砂体积约4mL

↓

用________倍体积的蒸馏水________此注射器以

除去__________________,流速为1mL/min

▲可溶性淀粉溶液：取________mg可溶性淀粉溶于100mL________中，搅拌均匀。

▲可溶性淀粉溶液：称取0.127g________和0。83g________。加蒸馏水100mL，完全溶解后装入滴瓶中.

6．实验步骤：

（1）淀粉溶液流经固定化酶柱

将灌注了________的注射器放在注射器架上，用滴管加________溶液，使该溶液以________mL/min的流速过柱。

（2）接取流出物

待从固定化酶柱中流出________mL的溶液后,接收________mL流出液。

（3)流出物鉴定

在流出物中加入________溶液，观察颜色。用水稀释________倍后再观察颜色.

(4)洗涤、保存固定化酶柱.

实验后，用________倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱。放置在________℃冰箱中保存.

(5)几天后取出冰箱中该固定化酶柱,重复实验,观察结果.

7．实验结果的比较：

答案：1。(1)固定化α淀粉酶（2）淀粉水解

2．α淀粉石英砂固定化酶柱糊精淀粉指示剂

红糊精

3．枯草杆菌的α淀粉5。5～7.550～75℃

5．实验材料及其制备：

（2)α淀粉酶酶不纯石英砂气门芯夹子10

洗涤未吸附的游离淀粉酶50热水碘碘化钾

6．(1）固定化酶淀粉0.3（2）50。5(3)KII2

1（4)104

7．蓝红红