医学机能学实验：药理学实验PPT教学课件.pptx

医学机能学实验;;;;机能学实验基本技能训练;【实验目的】

1.熟悉常用实验动物的基本知识。

2.掌握小鼠的捉拿、给药、处死等基本操作技能。

【实验动物】

小鼠，体重18～22g，雌雄兼用。

【实验材料】

实验器材：灌胃器、手术剪、手术镊、注射器（1mL）、玻璃钟罩、普通天平、透明尺等。

药品与试剂：络合碘、生理盐水、5%炭末阿拉伯胶。

【实验步骤】

一、观看实验录像

1.实验动物的基本知识，如动物的体重、年龄、性别、种系，实验动物的捉拿、给药、标号、麻醉方法等。

2.药物的基本作用。;二、基本操作训练

（一）小鼠的捉拿

小鼠可采取双手法和单手法两种捉拿形式。

双手捉拿法：右手提起鼠尾，放在粗糙面上或鼠笼盖上，向后方轻拉鼠尾，趁其向前挣扎逃跑之际，迅速用左手食指和拇指抓住小鼠的两耳及头颈部皮肤，翻转鼠体于手掌中，以左手无名指和小指压其尾根部于手掌尺侧，固定于手中，如图4-1所示。

单手捉拿法：用左手将小鼠置于鼠笼盖或粗糙面上，用左手手掌尺侧及小指、无名指夹住尾根部，然后再用左手拇指与食指捏住双耳及头颈部皮肤，如图4-2所示。

（二）小鼠的称重

将小鼠放在电子秤上进行称重。

;（三）小鼠的标号

不同的研究室有习惯的标号方法，图4-3所示为用络合碘做标记。一般可从小鼠的右前肢开始标记1号，右腹中为2号，右后肢为3号，头部为4号，背部为5号，尾根部为6号，左前肢为7号，左腹中为8号,左后肢为9号,10号为空白，如图4-4所示。

;（四）小鼠的给药方法

1.灌胃法：采用双手法或单手法捉拿小鼠后，使小鼠腹面朝上，右手持灌胃器，从小鼠口角插入口腔内，并使口腔和食道成一直线，经舌面紧贴上颚进入食道，进针2～3cm可注药,灌药量一般为0.1～0.3mL/10g体重，如图4-5和图4-6所示。若手法正确,则进针顺利；若进针遇到阻力，不能强插，应退出重插，以免刺破食管或误入气管，使小鼠死亡。;2.腹腔注射法：左手固定小鼠，使腹部面朝上，头呈低位，右手持注射器，在小鼠右下腹部进针，针头与腹平面成45°角，刺入腹腔会有落空感（抵抗力消失），此时应保持针头不动，推入药液，一次注射量为0.1～0.2mL/10g体重，如图4-7所示。注意勿在上腹部进针或使针头向上，以避免刺伤腹部内脏。

;3.尾静脉注射法：小鼠多采用尾静脉注射法，先将小鼠固定于固定器内或玻璃罩内，使尾巴露在外面，必要时可用45～50℃的温水浸泡尾部，或用75%乙醇擦拭尾部，使尾部血管充分扩张，选左、右两侧的一根充盈的静脉，用左手的拇指和食指捏住尾巴的末端，右手持注射器（4号针头），以30°角进行静脉穿刺，推注药液无阻力，并可见沿静脉血管出现一条白线，表明针头确实在血管内，可继续推完药液，如图4-8所示。一次注射量为0.05～0.1mL/10g体重,注射完毕,拔出针头,用手指按住进针部位止血。若推注药液时阻力很大，且局部皮肤发白发硬，说明针头不在静脉内，需拔出针头重新穿刺。应注意注射时先从尾梢开始，逐渐向尾根部移动进针点。

;4.皮下注射法：两人配合操作时，助手将小鼠头与尾牵向两端并固定，术者左手提起小鼠背部皮肤，右手持注射器刺入皮下，当针头能左右摆动时，可注药，注入量一般为0.1～0.2mL/10g体重。拔针时，左手捏住针刺部位，防止药液外漏。一人操作时，可把小鼠放置于粗糙的金属网上，左手拉住鼠尾，小鼠会努力向前移动，此时，右手持注射器迅速刺入背部皮下，注入药液。

5.肌肉注射法：将针头倾斜迅速刺入大腿外侧肌肉，回抽针栓若无回血，将药物注入，一般选肌肉发达、无大血管通过的部位，多选臀部，如图4-9所示。药物水溶液肌肉注射时吸收十分迅速，适用于油溶液和某些刺激性物质。参考给药量为小鼠给药量每次小于0.05mL。;（五）小鼠的处死方法

1.颈椎脱位法：用左手固定鼠颈部，右手捏住鼠尾，用力向后上方牵拉，听到或感到小鼠颈部有“咔嚓”声响，表明颈椎脱位，脊髓断裂，小鼠瞬间死亡，如图410所示。

2.断头法：用粗剪刀剪去头部，使小鼠迅速死亡。

（六）测定炭末推进率

【注意事项】

1.避免被小鼠咬伤。

2.注射前将注射器中的气泡排空。

3.灌胃时动作要轻柔。

;腹腔注射尼可刹米急性毒性实验;【实验目的】

1.了解药物急性毒性实验的一般要求和观察指征。

2.学习半数致死量（LD50）或半数有效量（ED50）的实验设计。

3.掌握序贯法急性毒性实验设计和LD50的计算方法。

【实验原理】

急性毒性实验的基本要求和观察指征：观察受试物一次给予受试动物所产生的急性毒性反应和死亡情况，并计算出LD50或最大耐受量。急性毒性实验的受试动物可以选用小鼠、大鼠、兔、犬等，以小鼠最常用。观察时间一般为用药后1～2周，至少7天。实验过程中应详尽观察并记录受试动物的中毒表现。

评价药物急性毒性反应