流式细胞术的原理和临床 (2).ppt

2．2临床应用2．3．1肾：现已将T细胞亚群分析作为监测同种异体肾移植受者免疫状态的一种方法。骨髓：FCM的细胞表型分析使免疫重建的监测和对新生的免疫生物学状态的了解成为可能。第31页,共41页，星期六，2024年，5月3.免疫治疗：许多疾病与免疫系统功能发生障碍有关，而某些疾病则是在病程中出现能变化。3.1FK-506及天花粉蛋白两者均为高效免疫抑制剂。已用于临床。用FCM通过监测人的免疫水平来判断疗效并调整药物及用量。第32页,共41页，星期六，2024年，5月3.2?IL—2它是免疫系统中重要的细胞因子。用FCM检测可发现：IL-2在离体时可诱导来源HIV患者外周血的单核细胞增生分化。发现IL-2治疗可使CD4细胞提高50%，故可周期性地用于HIV患者。第33页,共41页，星期六，2024年，5月3.3肿瘤免疫治疗近年来有了很大的进步。例如用IL-2活化的LAK细胞治疗肾癌、黑色素瘤、直肠癌等有一定疗效。用FCM可以估计治疗前后淋巴细胞亚群的变化以及活化状态，并判断免疫治疗的有效性。第34页,共41页，星期六，2024年，5月3.4移植免疫治疗目前临床移植配型以血清和细胞学为主，基因配型亦有发展。FCM移植配型的临床重要性在于抗体检测的特异性，敏感性以及结果和移植结果的相关一致性。FCM在监测移植后免疫状态变化和免疫抑制剂的疗效评估中是一项不可缺少的有效手段。第35页,共41页，星期六，2024年，5月流式细胞术在肿瘤学中的应用一.肿瘤诊断包括监测癌前期病变，肿瘤早期诊断，交界性肿瘤诊断和肿瘤细胞学诊断等各方面。DNA非整倍体的出现可能是癌变的一个重要标志，细胞的增殖能力大小也可反映肿瘤的生物学特性。因此，临床上可利用流式细胞术进行细胞周期分析和DNA倍体分析，辅助肿瘤诊断。第36页,共41页，星期六，2024年，5月一.肿瘤预后估计在病理组织学分级，临床分期等指标基础上，肿瘤DNA倍体可更客观地预测预后。通常，异倍体肿瘤恶性度、复发率、转移率、死亡率都较二倍体肿瘤要高。已有文献报道，在乳腺、结肠、直肠、前列腺和膀胱肿瘤中，异倍体和/或较高的S期百分比都是不良预后的标志。同样地，在肺、头颈部、卵巢、肾细胞、子宫内膜癌，黑色素瘤、非何杰金淋巴瘤和各种白血病中，亦有类似发现。第37页,共41页，星期六，2024年，5月流式细胞仪可以通过特异性的单抗监测肿瘤细胞中癌基因表达产物的水平以研究肿瘤调控因素。凋亡受内外环境中各种因素构成的网络控制和基因控制。利用各种调控因素的作用，有目的地诱导或控制细胞凋亡，可能是增加化疗效果，消灭肿瘤细胞的新途径。FCM通过对凋亡的检测，可以研究调控因素如癌基因，r-射线，温度及化疗药物等对凋亡的影响，最终达到治病的目的。第38页,共41页，星期六，2024年，5月流式细胞仪在血液学中的应用一.白血病和淋巴瘤FCM可选择已标记的CD系列及其他单克隆抗体对白血病进行免疫表型分析，免疫表型分析，提高亚型诊断水平。白血病细胞免疫分型的特点，反映了其本质上与相应正常骨髓细胞的差异，白血病细胞丧失了正常细胞的系列专一性和分化阶段规律性，此特点有利于鉴别诊断和残存白血病鉴别。第39页,共41页，星期六，2024年，5月一.网织红细胞记数FCM可以大量、快速、敏感、自动化地监测网织红细胞数量变化通过对红细胞RNA量和细胞大小的分析，可了解红细胞生成动力学过程。第40页,共41页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第41页,共41页，星期六，2024年，5月关于流式细胞术的原理和临床(2)溴脱氧脲嘧啶核苷替代胸腺嘧啶脱氧核苷参与DNA的合成，测定DNA的合成速率。异染性荧光染料AO，同染DNA、RNA识别G0/G1期。第2页,共41页，星期六，2024年，5月二．测定细胞周期蛋白、癌基因及抗癌基因蛋白对细胞周期调节机理研究进展较快，真核细胞的增殖是控制在细胞周期的特定阶段，特别是在G1到S期以及G2到M期移行部位。Cyclin（周期蛋白）作为Cyclin依赖性cdk复合体的调节亚单位，对细胞周期起重要的调节作用。第3页,共41页，星期六，2024年，5月Cyclin家族中有8种CyclinA、B、C、D、E、