高分辨质谱法快速识别强肝胶囊中的化学成分.pptx

高分辨质谱法快速识别强肝胶囊中的化学成分

创新实验设计

汇报人：xx

组员：xx

指导老师：xx

目录

一、实验背景

二、实验简介

三、实验目的

四、实验原理

五、实验提示

六、实验步骤

七、结果与讨论

八、优势与特色

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一、实验背景

中药是中华民族的瑰宝，中药复方是中药临床用药的主要形式。

强肝胶囊来源于中医经典方剂“强肝汤”，处方由茵陈等16味中药组成，历经数年开发成胶囊剂，临床广泛用于治疗多种肝脏疾病。然而，目前强肝胶囊的化学成分谱的研究还不够充分。

因此，本实验以临床疗效确切的强肝胶囊为研究对象，拟采用高分辨质谱法快速识别强肝胶囊中的化学成分，将为其物质基础、质量控制、药理活性的研究提供实验理论依据。

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16味中药

复杂成分

物质基础

质量控制

药理活性

二、实验简介

实验类型：综合设计实验

实验时长：8学时（分两次进行）

教学过程:

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学生分组、查阅文献、制订方案

进行实验

分析结果、撰写报告

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三、实验目的

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四、实验原理

液质联用（HPLC-MS)以液相色谱作为分离系统，质谱为检测系统。样品经液相系统分离，被离子化后，经检测器得到未知化合物的质谱图，再与已知的质谱图进行对比，确定待测化合物。

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五、实验提示

供选药物：强肝胶囊及其对照品；

查阅文献：了解药物性质和特点，学习仪器操作方法及现有研究强肝胶囊有效成分的方法；

研究基础：摸索合适的色谱条件和质谱条件，为研究提供基础。

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8

仪器：超高效液相色谱四级杆飞行时间质谱仪

ACQUITYUPLC®HSSC18色谱柱（2.1×150mm,1.8μm）

LC-30A超高效液相色谱仪

试剂：甲醇、乙腈，甲酸、乙酸铵，水为娃哈哈纯净水。

样品：强肝胶囊（批

对照品：栎瘿酸，丹参酮ⅡA，精氨酸，芍药苷，丹酚酸B，毛蕊异黄酮葡萄糖甲苷，蒿本内酯，梓醇，熊果酸，毛蕊花糖苷，绿原酸，（R、S）-告依春，阿魏酸，甘草苷，黄芪甲苷。

仪器和试剂

实验要求与组织

实验按小组进行，3-5人/组，组长负责协调各组员分工；

利用各种检索工具查阅相关文献并做出较为详细的摘录；

参考相关文献,通过团队的综合思考，拟订详细的实验方案，并按计划实施；

对实验结果进行详细的归纳总结。

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六、实验步骤

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制备强肝胶囊和混合对照品溶液

UHPLC-Q-TOF-MS/MS分析

对照品

化学成分数据库，利用一级和二级质谱进行鉴定

色谱保留时间和质谱信息进行匹配

推断强肝胶囊中可能存在的化学成分

有targeted

non-targeted无

六、实验步骤

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液相条件

质谱条件

液相色谱仪

LC-30A高效液相色谱仪

色谱柱

ACQUITYUPLC®HSSC18色谱柱（2.1×150mm×3μm）

流动相

A：0.1%甲酸水

B：乙腈

洗脱

梯度

0-6min,2-10%B

6-21min,10-30%B

21-27min,30-60%B

27-29min,60-100%B

29-30min,100-2%B

流速

0.3mL/min

柱温

35℃

进样量

5µL

质谱仪

TripleTOF™5600+

离子源

ESI源

采集模式

IDA

正负模式

PositiveandNegative

GS1

50psi

GS2

55psi

CUR

35psi

TEM

500℃

ISVF

4.5/-4.5kV

TOFMasses

HighSensitivity

Parameters

Positive

Negative

DP(V)

80V

-80V

CE(eV)

45eV

-45ev

CES(eV)

20

20

TOFMasses(Da)

100-1200

100-1200

ProductIonMasses(Da)

50～1200

50～1200

七、结果与讨论

图A负离子模式下强肝胶囊样品的总离子流图

图B正离子模式下强肝胶囊样品的总离子流图

七、结果与讨论

通过与对照品信息匹配，10个化合物得到明确的鉴定。

根据精确质量数以及二级碎片鉴定出37个化合物。

表1UHPLC-Q-TOF-MS/MS法鉴定强肝胶囊中主要化学成分结果

No.

RT

(min)

Selectionmode

ExtractionMassm/z

FoundMassm/z

Error(ppm)

ChemicalFormula

Majorfragments

Identificationresult

PlantSou