表观遗传调控对腹主动脉瘤患者单个核细胞的影响.ppt

表观遗传调控对腹主动脉瘤患者

单个核细胞的影响

中国医科大学附属第一医院血管外科夏茜张健辛世杰段志泉胡海地研究背景AAA的发病率逐年上升。破裂性AAA死亡率高。病因复杂：氧化损伤、炎症、血管退行性变、中膜平滑肌的减少、自身免疫性疾病的特征等。前期研究已证实AAA患者外周血存在Fas系统缺陷和Treg数量和功能的缺陷。JianZhang,etal.ImpairedFas-inducedapoptosisofTlymphocytesinpatientswithabdominalaorticaneurysmsJVASSURG2007May;45(5):1039-46YinM,etal.DeficientCD4+CD25+Tregulatorycellfunctioninpatientswithabdominalaorticaneurysms.ArteriosclerThrombVascBiol.2010;30:1825-31研究背景表观遗传学：不改变DNA序列的情况下改变基因的功能。研究内容：DNA甲基化、组蛋白乙酰化等。表观遗传学调控具有可逆性。Krishnaetal.GeneticandepigeneticmechanismsandtheirpossibleroleinAAAAtherosclerosis2010.研究AAA患者外周血单个核细胞DNA甲基化和组蛋白乙酰化水平的改变。01AAA的直径大小是否与DNA甲基化和组蛋白乙酰化的变化存在相关性02与表观遗传学改变密切相关的酶类的改变03研究目标实验设计流程图正常对照组提取DNA提取组蛋白提取RNADNA浓度测定BCA蛋白测定RNA浓度测定DNA甲基化测定组蛋白乙酰化测定Real-timePCRAAA组Ficoll分离PBMCs统计学分析：t检验、χ2检验、相关性分析实验方法1.一般资料AAA组(22例)对照组(20例)P值性别（男）17(77%)17(85%)0.524年龄（岁）65.77±8.5263.3±9.940.391吸烟史7(32%)8(40%)0.58高血压病史13(59%)9(45%)0.361糖尿病病史3(14%)4(20%)0.58冠心病病史4(18%)3(15%)0.782WBC（*109/L）7.83±2.566.59±1.730.102LB（*109/L）1.85±0.392.17±0.620.11实验方法2.腹主动脉瘤直径序号性别/年龄AAA直径序号性别/年龄AAA直径1M/725.012M/623.82F/745.013M/703.23M/626.014M/645.54M/556.215M/583.75M/785.416M/616.76M/725.017F/595.87F/605.818F/693.48F/655.019M/715.29M/477.020M/814.810M/594.921M/766.111M/744.922M/585.5实验方法3.引物设计基因名称上游引物（5’-3’）下游引物（5’-3’）DNMT1CTTCGGCAACATAATGGACACTTTGGCCAACATACAAAGCTTGADNMT3ACCGGAACATTGAGGA