白血病分子诊断技术(咸阳).ppt

BCR-ABL融合基因检测：t(9;22)(q34;q11)BCR-ABLp210t(9;22)(q34;q11)BCR-ABLp230BCR-ABL融合基因ABL激酶突变检测CML病例中的应用P210型M-bcr（绝大多数）b3-a2（55%）b2-a2（40%）b3-a2和b2-a2（5%）b3-a3（罕见）b2-a3（罕见）p230型u-bcre19-a2（罕见）超过95%的CML病例中存在BCR-ABL融合基因BCR-ABL融合基因定性检测：RT-PCR定量检测：QRT-PCR定性检测报告模板定量检测报告BCR-ABL融合基因ABL激酶突变检测ABL激酶突变会引起伊马替尼治疗耐药T315I耐药机制:T315突变后不能与伊马替尼形成关键性的氢键，可完全阻断伊马替尼与ABL激酶区的结合,从而耐药。P环的突变(244-255)耐药机制：如Y253F／H、E255K／V、Q252H、G250E等通过改变ABL激酶的空间构象，亦可阻碍伊马替尼与之结合。A环突变(381-402)01一般提高用药量可以降低耐药程度。02其它突变03对于耐药程度较弱的突变，如M244V、G250E、F317L、E355G、F359V及V379I等，通过提高药物剂量，可以克服耐药。04报告模板t(1;19)(q23;p13)E2A-PBX1t(4;11)(q21;q23)MLL-AF4t(12;21)(p13;q22)TEL-AML1t(9;22)(q34;q11)BCR-ABLALL相关基因全套检测ALL病例中应用t(1;19)(q23;p13)E2A-PBX1融合基因t(1;19)(q23;p13)易位可以在5-6%的儿童ALL病例和3%的成人ALL病例检测到。这一易位几乎全部出现在前B细胞ALL病例中。携带有该易位的病人，其临床症状都比较凶险。1在50-70%的婴幼儿ALL和将近5%的小儿和成人ALL病例中有MLL-AF4融合基因。2t(4;11)(q21;q23)与前B-ALL相关。3在婴幼儿ALL中MLL-AF4融合基因被认为是预后不好的标志。在成人ALL中也是一个坏的标志，但对于成人ALL，该融合基因的存在似乎能增强高剂量的阿糖胞苷（Ara-c）的疗效。t(4;11)(q21;q23)MLL-AF4融合基因t(12;21)(p13;q22)是儿童ALL中最为常见的易位，几乎25%的小儿ALL有该易位。其主要的阳性病人出现在1-12岁之间，其中2-5岁这个年龄段最多。所有的病例其免疫分型都是前B细胞ALL。t(12;21)阳性的病人都有较好的预后，其复发的时间也会较晚。t(12;21)(p13;q22)TEL-AML1融合基因Ph染色体在5%的小儿ALL和20-50%（随年龄增加比例也增加）的成人ALL中也可见。在Ph+的ALL中40%的BCR-ABL融合基因是p210型的，60%是p190型的。在ALL中，PH阳性和随之出现的BCR-ABL融合基因是一个非常不好的标志。020301t(9;22)(q34;q11)BCR-ABL融合基因ALL相关基因全套检测MLL/AFXMLL/AF1PMLL/AF4MLL/AF6dupMLLMLL/ENLE2A/PBX1BCR/ABL（p210）E2A/HLFBCR/ABL（p190）SIL/TAL1TEL/AML1TLS/ERGTEL/ABLHOX11CLL病例中的应用IgVH基因重排检测：IgVH突变状态：按照细胞IgVH的突变状态可以将CLL分为突变的CLL（M-CLL）与未突变的CLL(U-CLL)。前者预后较好。而后者则疾病进展快，生存期短。IgVH基因重排阳性的CLL患者预后较好融合基因套系融合基因套系临床意义白血病31种融合基因筛查ALL、AML、CML、MDS等的辅助诊断、预后判断和疗效监测AML16种融合基因筛查AML的辅助诊断、预后判断和疗效监测ALL15种融合基因筛查ALL的辅助诊断、预后判断和疗效监测白血病31种融合基因筛查其它检测项目TCR/IgH重排BCL-1/JH、BCL-2/JH检测IGH与TCR重排TCR基因重排成熟T细胞成熟B细胞单克隆重排：淋巴细胞异常标志多克隆性重排：淋巴细胞正常生长发育IgH基因T细胞B细胞淋巴细胞克隆性的检测对鉴别良、恶性淋巴细胞增生有重要的参考价值。logoALL、CLL、淋巴瘤辅助