溶血性贫血的实验室检查.ppt

4.蔗糖水溶血试验【原理】蔗糖离子浓度低，增强补体与红细胞结合，使红细胞膜上形成小孔，蔗糖进入红细胞而致溶血。【临床意义】正常阴性。PNH本试验常为阳性。可作为PNH筛选试验，阴性可排除，阳性应作Ham试验。第30页,共42页，星期六，2024年，5月（二）红细胞内酶缺陷的检验1.自身溶血试验及纠正试验【原理】细胞内酶缺陷（葡萄糖-6-磷酸脱氢酶G-6PD、丙酮酸激酶），葡萄糖酵解障碍，不能提供足量ATP，红细胞在自身血浆中温育48小时，不能继续从血浆摄取葡萄糖作能量来源，ATP减少，不能维持红细胞内钠泵作用，导致溶血增加。在温育过程中分别加入葡萄糖和ATP作纠正物，看溶血能否纠正。第31页,共42页，星期六，2024年，5月【参考值】正常人轻微溶血，溶血度3.5%；加葡萄糖、ATP溶血明显纠正，溶血度1%。【临床意义】1）葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6PD）缺乏症、蚕豆病溶血增加，加葡萄糖、ATP溶血部分纠正。2）丙酮酸激酶缺乏症加葡萄糖不能纠正，加入ATP能纠正。第32页,共42页，星期六，2024年，5月（三）异常血红蛋白的检测血红蛋白电泳检测【参考值】正常成人电泳图谱显示4条区带，最多的是HbA,少量HbA2，再后为两条两更少的红细胞内的非血红蛋白成分（NH1、NH2）。【临床意义】有异常血红蛋白区带见于海洋性贫血、异常血红蛋白病第33页,共42页，星期六，2024年，5月(四)自身免疫性溶血的检验1.抗人球蛋白试验(Coombs’test)【原理】红细胞的膜电位使两个红细胞间保持一定距离。不完全抗体IgG分子较小，无法连接两个邻近的红细胞而只能和一个红细胞抗原相结合。用正常人血清免疫家兔，获得抗人球蛋白血清。抗人球蛋白是完全抗体，可与多个红细胞表面不完全抗体结合，使红细胞相互连接起来出现凝集现象，称为抗人球蛋白试验阳性。直接抗人球蛋白试验：检测红细胞表面结合有不完全抗体。间接抗人球蛋白试验：检查血清中有无游离的不完全抗体。第34页,共42页，星期六，2024年，5月抗人球蛋白IgG不完全抗体RBC第35页,共42页，星期六，2024年，5月第36页,共42页，星期六，2024年，5月将病人血清和正常RBC混合，再加入抗IgG试剂病人血清RBC抗IgG第37页,共42页，星期六，2024年，5月【参考值】正常人直接、间接均抗人球蛋白试验均阴性【临床意义】1）阳性见于AIHA，新生儿溶血病，SLE等2）AIHA大多为IgG（温抗体型37℃条件下作用最强），少数为IgM(冷抗体型4℃条件下进行试验)3）间接试验主要见于Rh或ABO妊娠免疫性新生儿溶血病母体血清中不完全抗体检测。第38页,共42页，星期六，2024年，5月（五）冷凝集试验【原理】机体存在抗自身红细胞抗体，在低温时与相应抗原结合，使红细胞凝集，特别是在4℃时最强烈，但温度升高到37℃后凝集消失，称为冷凝集试验。【参考值】效价1：40【临床意义】某些AIHA，传染性单核细胞增多症、恶性淋巴瘤等可阳性。动态检测，凝集效价增高4倍以上较有诊断价值。第39页,共42页，星期六，2024年，5月溶血性贫血的检测1.是否为溶血性贫血2.区分溶血部位3.溶血原因诊断第40页,共42页，星期六，2024年，5月学习重点Coombs’试验、酸溶血试验、渗透脆性试验等的临床意义第41页,共42页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第42页,共42页，星期六，2024年，5月关于溶血性贫血的实验室检查溶血性贫血定义各种原因导致红细胞生存时间缩短、破坏增多或加速，骨髓代偿造血功能不足时所发生的一类贫血叫溶血性贫血。指骨髓代偿能力足以补偿红细胞的损耗而不出现贫血时称溶血性疾患。第2页,共42页，星期六，2024年，5月溶血性贫血的分类按发病机制分类1.RBC内在因素（遗传性/获得性）RBC膜缺陷：遗传球、PNHRBC酶缺陷：G-6PD缺乏症珠蛋白异常（肽链不平衡）：海洋性贫血、异常血红蛋白病2.RBC外在因素（获得性）免疫性溶贫:AIHA、新生儿溶血症、药物诱发红细胞相关抗体机械损伤性：DIC、TTP、人造瓣膜感染：疟疾物理因素：灼伤毒素：蛇毒脾亢:单核巨噬细胞功能亢进第3页,共42页，星期六，2024年，5月溶血性贫血的分类按溶血发生部位分类（RBC破坏场所）血管内溶血：RBC在血管内破坏见于DIC、机械性微血管病变、烧伤、输血、PNH血管外溶血：RBC在