肿瘤的分子生物学检验技术--课件.pptVIP

*三、肿瘤相关单核苷酸多态性1.SNP与肿瘤肿瘤易感基因、肿瘤药物治疗相关基因肿瘤个体化诊疗2.SNP的研究思路研究对象差异性研究技术：PCR、芯片研究难点：样本采集*ppt课件*四、肿瘤相关表观遗传异常（一）表观遗传（epigenetics）是指DNA序列不发生变化，但基因表达却发生了可遗传的改变。这种改变是细胞内除了遗传信息以外的其他可遗传物质发生的改变，且这种改变在发育和细胞增殖过程中能稳定传递。（二）分子机制：1、基因印记丢失，一对等位基因只表达来自亲本一方的等位基因，而与性别无关。2、DNA甲基化：例如启动子区域的CpG岛高甲基化所致抑癌基因转录沉默3、组蛋白修饰与染色体重塑*ppt课件*五、肿瘤相关miRNA1、miRNA与肿瘤miRNA与肿瘤发生、发展、诊断、治疗、预后2、miRNA类肿瘤标志物的研究思路研究对象：实体瘤、细胞、循环血、其他研究技术：定量PCR、westernblot、芯片、免疫组化、细胞培养（增殖、迁移、浸润）等等*ppt课件第三节肿瘤分子生物学检验的临床应用*ppt课件肺癌*ppt课件肺癌的分子遗传特征1、细胞色素P450家族，绝大多数的致癌物包括内源性和外源性都需经过P450转化，研究最多的CYP1A12、谷胱甘肽转移酶（GST）家族,使致癌物失活3、NAT2家族，解毒作用*ppt课件*肺癌的分子生物学检验1、EGFR（原癌基因表皮生长因子受体）基因检测大多数在NSCLC中过表达且是重表皮生长要是治疗靶标，EGFR是表皮生长因子相关酪氨酸受体家族的成员，通过与配体的结合，受体同源和异源二聚体化，从而激活受体内源性的酪氨酸激酶，并引发下游信号级联反应，主要包括Ras-Raf-MAP激酶信号通路、PⅠ3K-Akt信号通路和STAT通路。这些信号通路对细胞的增值、分化、迁移和血管生成有很强的刺激效应。*ppt课件*肺癌的分子生物学检验2、K-ras检测ras基因，特别是K-ras基因，与肺癌的发生及预后有关。有20%-30%的NSCLC患者存在K-ras基因突变。80%-90%的突变是12密码子G-T引起的，导致K-ras蛋白组成性活化，NSCLC患者伴随K-ras突变与预后不良有关，K-ras突变与EGFR突变是相互排斥的。伴随K-ras突变的NSCLC患者EGFR-TKⅠ3药物敏感性较差*ppt课件Leber病变相关的mtDNA突变常用检测技术PCR-RFLP技术PCR-SSCP技术DHPLC技术DNA测序技术SchoolofLaboratoryMedicine,WenzhouMedicalCollege*G3460A，G11778A，T11484C原发性突变测序图*ppt课件三、线粒体病的分子生物学检验应用（三）药物性耳聋*ppt课件突变位点基因同质性/异质性疾病首次报道aT961delT+C(n)ins961insC12SrRNA同质性药物性耳聋/非综合征型耳聋Bacinoetal.(1995)Tangetal.(2002)T1095C12SrRNA同质性/异质性药物性耳聋/非综合征型耳聋Thyagarajanetal.(2000)C1494T＊12SrRNA同质性药物性耳聋/非综合征型耳聋Zhaoetal.(2004)A1555G＊12SrRNA同质性/异质性药物性耳聋/非综合征型耳聋Prezantetal.(1993)G1606AtRNAVal异质性综合征型耳聋Tirantietal.(1998)A3243G＊tRNALeu(UUR)异质性综合征型耳聋vandenOuweland,etal.(1992)G7444ACO1/tRNASer(UCN)同质性/异质性药物性耳聋/非综合征型耳聋Pandyaetal.(1999)A7445G＊CO1/tRNASer(UCN)同质性/异质性非综合征型耳聋Reidetal.(1994)7472insC＊tRNASer(UCN)同质性/异质性综合征型耳聋Tirantietal.(1995)T7511C＊tRNASer(UCN)同质性/异质性非综合征型耳聋Sueetal.(1999)T7512CtRNASer(UCN)同质性/异质性综合征型耳聋Nakamuraet