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生理学试验手册

EXPERIMENTMANUALFORPHYSIOLOGY

专业及班级：

学号：

姓名：

组别：

天津医科大学临床医学院生理学试验室

试验一标本制备及BL-410生物机能试验系统的使用

Experiment1PreparationofspecimensandtheuseofBL-410

biologicalfunctionofexperimentalsystem

同组人姓名(thenameofthestudentsinthesamegroup)

日期(date):年月日

【试验目的】

掌握制备坐骨神经-腓肠肌标本的操作技术，为此后有关的神经肌肉试验打下基础；熟悉BL-410生物机能试验系统的使用。

【试验原理】

蛙或两栖类动物的某些基本生命活动及生理功能与温血动物近似，并且其离体组织需要的生活条件非常简朴，易于控制和掌握。因此在生理学试验中，坐骨神经-腓肠肌标本是研究神经肌肉生理最常用的对象，常常用来研究神经肌肉的兴奋性、刺激与反应的规律、肌肉收缩的特点、兴奋性的周期性变化等。

【试验器材和药物】

蛙类手术器械一套(金属探针1根，粗剪刀、眼科剪刀各1把，圆头镊子、眼科镊子各1把，玻璃分针2根),蛙板和玻璃板各1块，培养皿，滴管，废物缸、锌铜弓，丝线，棉花；任氏液。

【试验对象】蟾蜍或蛙。

【试验措施和环节】

1.破坏脑和脊髓(常用的有三种措施)

(1)俯式捣毁法：是最常用的措施。以左手持蟾蜍，将其腹面朝向手心，前肢

夹在食指和中指之间固定，后肢夹在无名指和小指之间固定，并用拇指按压蟾蜍头部使之下俯30~40度角；然后右手持金属探针沿蟾蜍头部的中线下划，可触及一凹陷处即为枕骨大孔。将探针从枕骨大孔垂直刺入1~1.5mm,再向前刺入颅腔，左右搅动(可感觉到探针与颅骨壁的碰击),破坏脑组织；再将探针退回至进针处，但不拔出而是转向后方刺入椎管，破坏脊髓。

(2)仰式捣毁法：将蟾蜍仰卧于蛙板上，拉开下颌，右手持探针在颅底两眼之间向前下刺入颅腔，用探针在颅腔内向四面捣毁脑组织，然后将探针退至粘膜下，针尖向后平行刺入椎管内以破坏脊髓。

(3)横断脊柱后捣毁法：左手持蟾蜍，右手持粗剪刀，在两腋窝稍下横断脊柱，然后在脊柱呈白色的脊髓断面处，向上插入探针破坏脑，再向下插入探针破坏脊髓。

以上措施破坏脑和脊髓成功后，蟾蜍出现四肢(尤其是后肢)瘫软，并常有尿失禁现象。

Schematicsforhandingoftoad

2.剪去躯干上部及内脏用粗剪刀在两侧腋部稍下(或在骶骼关节以上1.5~2cm处)剪断脊柱，用左手握住蟾蜍后肢，拇指按压骶骨，使蟾蜍头部及内脏自然下垂；避开腰骶神经丛后，右手用粗剪刀沿脊柱两侧剪开腹壁，在耻骨联合处将躯干上部及内脏剪掉，弃入废物缸内。

3.剥皮左手持大镊子夹住脊柱断端(小心勿伤神经),右手捏住脊柱断端的皮肤边缘，逐渐向下剥去所有后肢皮肤。将剥好的标本放置在盛有任氏液的培养皿

中，或置于洁净的玻璃板上，滴加任氏液备用。然后洗手并清洗用过的手术器械。

4.分离左右腿用圆头镊子夹住脊柱并提起，避开坐骨神经，用粗剪刀剪去向上突出的骶骨，沿脊柱正中线将脊柱从上向下提成两半，再从耻骨联合中央剪开(注意：剪开时应防止剪刀走“S”形，以保证坐骨神经的完整),将已分离的两腿浸入任氏液备用。亦可在游离大腿部位的坐骨神经后再分离两腿。

5.游离坐骨神经取蟾蜍腿一条，用玻璃分针在大腿背面内侧沿坐骨神经沟(股二头肌与半膜肌之间)分离肌肉，暴露坐骨神经。向上将梨状肌及其附近的结缔组织剪断，然后用玻璃分针沿脊柱自上而下轻柔游离坐骨神经腹腔部(坐骨神经呈亮白色束状),用眼科剪刀剪断神经的所有分支，在近脊柱处穿线结扎，从脊柱根部将坐骨神经剪断。也可以不结扎、不剪断神经，而保留一小块与神经相连的脊柱(约0.5cm×0.5cm左右),供握持神经用。

6.游离股骨将游离的坐骨神经轻轻搭在腓肠肌上，切断膝关节周围的大腿部肌肉，把股骨刮洁净，然后剪去股骨小头并保留余下的股骨(约1~1.5cm),以便在固定神经肌肉标本时使用。

7.完毕标本用眼科镊子(或小剪刀)在跟健下方穿一洞，向上游离腓肠肌至膝关节处。穿线结扎腓肠肌跟健，左手提线，在结扎线远端剪断跟健。将膝关节如下的小腿其