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病理科常规技术室工作流程及日常工作质量控制2016年8月30日病理科工作流程接受标本(编号、登记)——固定——标本取材、记录——脱水——常规制片(包特殊染色埋、切片、染色)——免疫组化|——————归档目录一、组织脱水、透明、浸蜡二、全密闭程序控制自动组织脱水机三、组织包埋制作技术四、石蜡组织切片制作技术五、苏木素-伊红染色技术六、程序控制的自动组织切片染色机七、全自动组织玻片封片机一、组织脱水、透明、浸蜡组织脱水1.脱水的目的和原则:组织经固定后,含有大量水分,组织在透明浸蜡前必须进行脱水,就是用某些溶剂将组织内的水分逐渐置换出来,以利于透明剂和石蜡的渗入,这个过程称为脱水。原则1.脱干净但又不过脱水;2.脱水剂自低浓度至高浓度进行。2.常用脱水剂:乙醇、丙酮3.常用脱水顺序是:70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇Ⅰ、95%乙醇Ⅱ、无水乙醇Ⅰ、无水乙醇Ⅱ。一、组织脱水、透明、浸蜡组织透明1.透明的目的和原则:组织脱水后必须经过一种既能与乙醇相结合,又能溶解石蜡的溶剂,通过这种溶剂的媒介作用石蜡进入组织。这种溶剂使组织呈现出不同程度的透明状态,这个过程称为透明。2.常用透明剂:二甲苯教材:在进入二甲苯透明前,需要先经过无水乙醇和二甲苯的混合液30min。二甲苯Ⅰ和二甲苯Ⅱ透明的总共试剂必须控制在1.5h以内。一、组织脱水、透明、浸蜡组织浸蜡1.组织浸蜡的目的:组织经过脱水、透明后用的石蜡、火胶棉、明胶等支持剂浸入组织内,使组织变硬并将组织包裹在内,有利于切片,这个过程称为浸蜡。2.组织浸蜡的方法:经数次石蜡浸泡(一般为3~4个步骤,每步50~60min)置换出组织内的透明剂,使纯净的石蜡浸入组织内。浸蜡用的石蜡熔点一般为58~60℃。3.浸蜡剂的种类:石蜡(最广泛应用)、火胶棉、明胶二、全密闭程序控制自动组织脱水机1、全密闭式程序控制自动组织脱水机的结构控制面板、处理槽、石蜡箱、试剂柜等2、全密闭式程序控制自动组织脱水机的功能可设定密码、延时功能、小标本当日完成、加温功能、报警功能等3、全密闭式程序控制自动组织脱水机程序的设置二、全密闭程序控制自动组织脱水机二、全密闭程序控制自动组织脱水机4、全密闭式程序控制自动组织脱水机液体的更换规律及原则理论上讲每次更换液体应该将脱水机内的液体全部更换。(1)一般固定液每周更换一次。若组织块较多(每天200~300块),固定液没三天更换一次。(2)脱水剂梯度酒精每周更换一次(150块/天,如果每天处理300块左右,应该3天更换一次乙醇)。方法是将第2缸的80%乙醇倒弃,95%乙醇及无水乙醇依次迁移。(3)透明二甲苯10~15天更换一次,二甲苯第一缸倒弃,第二缸前移。(4)石蜡必须干净无杂质。建议1500~2000块将第一缸石蜡废弃。二、全密闭程序控制自动组织脱水机5、全密闭式程序控制自动组织脱水机液体的操作方法从取材室与取材医师完成标本核对后,将组织拿至脱水机,此刻脱水机界面如下图所示1.确认清洗程序完成,打开处理槽盖。2.擦净槽盖面及槽内水气,槽内残渣。3.将脱水栏按顺序平稳放好,盖紧槽盖、确认锁定。4.选择层数(level)、选择并确认使用的程序(ProgressSelect),立即开始(ImmediateStart)处理组织。5.脱水程序处理完成,按(drainallchamber)将处理槽内的石蜡排空。6.打开处理槽盖,取出脱水栏,将槽内残蜡擦拭干净。7.盖好处理槽盖,按(flushstart)清洗,整个处理程序完成。二、全密闭程序控制自动组织脱水机备注:1.如果脱水过程中,有需要继续添加的组织,选择LidRelease键,然后将盖子打开,将组织放入脱水机,然后按屏幕上Restart所对应的按键即可2.每次脱水完成前、后都应擦拭反应缸,脱水完成后,取出组织,应将组织篮放入反应缸中运行冲洗程序,以脱去反应缸及其组织篮中的石蜡以方便取材。3.应定期检测石蜡液面,正常情况下每周检测一次,如一段时间内标本过多或者过少,可以适当减少或者增加检测周期,防止出现石蜡液面不够的情况。4.脱水机需要定期擦拭保养,并填写设备维护保养记录。三、组织包埋制作技术包埋的定义:组织块经过固定、脱水、透明剂(石蜡、

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