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陆地棉早花基因GhPRR9的功能分析及验证
目录
内容描述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3
1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.2研究目标与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.3文献综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6
2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
2.1.1陆地棉品种．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
2.1.2试验环境条件．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9
2.1.3实验仪器与试剂．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10
2.2实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
2.2.1基因克隆与表达分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13
2.2.2功能验证实验设计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
2.2.3数据收集与处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
GhPRR9基因的克隆与表达分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
3.1目的基因的克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17
3.2GhPRR9基因表达模式研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
3.2.1不同生长阶段的表达分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19
3.2.2胁迫条件下的表达变化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20
3.3GhPRR9基因的功能验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
3.3.1过表达载体构建与转化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22
3.3.2沉默载体构建与转化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23
3.3.3功能互补实验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
GhPRR9基因在植物抗病性中的作用分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
4.1基因敲除突变体表型分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26
4.1.1抗病性状表现．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27
4.1.2生理生化指标测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28
4.2基因功能鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29
4.2.1蛋白表达水平分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30
4.2.2免疫印迹分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31
4.2.3亚细胞定位分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
4.3基因互作网络分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
4.3.1转录因子预测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34
4.3.2蛋白质蛋白质相互作用分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35
GhPRR9基因在植物生长发育中的作用分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36
5.1基因表达模式研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37
5.1.1发育阶段特异性表达分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38
5.1.2胁迫响应表达分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39
5.2基因功能验证．．．．．．．．．．．．
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