分析化学-液相色谱法PPT课件.pptx

十二月241第十二章液相色谱法第一节概述第二节柱色谱法第三节平面色谱法思考与练习第1页/共68页

十二月242第一节概述色谱法(chromatography)又称层析法，是一种依据物质的物理化学性质的不同(如溶解性、极性、离子交换能力、分子大小等)而进行的分离分析方法。一、色谱法的产生和发展二、色谱法的分类三、色谱法的基本原理第2页/共68页

十二月243一、色谱法的产生和发展俄国植物学家茨维特在1906年使用的装置，如图：起分离作用的柱子叫色谱柱，其中的一相固定不动，称为固定相；另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体(气体或液体)，称为流动相。色谱法是一种分离技术第3页/共68页

十二月244二、色谱法的分类色谱法LLC分离机理液相色谱法吸附色谱法分子排阻色谱法两相状态分配色谱法LSC操作形式气相色谱法GSCGLC离子交换色谱法纸色谱法柱色谱法薄层色谱法第4页/共68页

十二月245三、色谱法的基本原理（一）.色谱过程色谱法是一种分离技术，它是被分离物质分子在两相间分配平衡的过程。以分离顺式和反式偶氮苯为例来说明色谱过程由于两组分的性质存在微小差异，因而吸附剂对它们的吸附能力略有不同。经一段时间后，两组分的微小差异逐渐变大，最后彼此分离，而先后流出色谱柱。第5页/共68页

十二月246小结：色谱过程组分的结构和性质微小差异与固定相作用差异随流动相移动的速度不等差速迁移色谱分离。两相及两相的相对运动构成了色谱法的基础；色谱过程就是组分的分子在流动相和固定相间多次“分配”产生“差速迁移”的过程。第6页/共68页

十二月247（二）分配系数K被分离组分以不同的程度分布在两相中，溶质既可进入固定相，也可进入流动相，这个过程叫分配分配系数:在一定的温度和压力下，某组分在两相间的分配达到平衡时浓度（或溶解度）之比。组分在流动相中的浓度cm组分在固定相中的浓度csK=K吸附色谱：吸附平衡常数分配色谱：分配系数离子交换色谱：交换系数凝胶色谱：渗透系数(吸附系数)第7页/共68页

十二月248（三）保留值某组分从开始洗脱到从柱中被洗脱下来所需要的时间称为保留时间(retentiontime)，通常用符号“tR”表示。某组分从开始洗脱到从柱中被洗脱下来所需要的流动相的体积称为保留体积(retentionvolume)，通常用符号“VR”表示。保留值是色谱法定性分析的基本参数。第8页/共68页

十二月249（四）分配系数与保留值的关系K值越大，移动速度越慢，tR越长，后出柱K值越小，移动速度越快，tR越短，先出柱混合物中各组分间的分配系数K相差越大，各组分越容易被分离第9页/共68页

十二月2410第二节柱色谱法一、液-固吸附柱色谱法二、分配柱色谱法三、离子交换柱色谱法四、凝胶柱色谱法第10页/共68页

十二月2411一、液-固吸附柱色谱法（一）原理利用吸附剂对不同组分的吸附能力的差异进行分离的一种色谱法。吸附作用与吸附平衡吸附平衡常数（吸附系数）组分在流动相中的浓度组分在吸附剂中的浓度=K影响K的因素:吸附剂的活性、组分和流动相的性质K的意义:组分的吸附系数K越大，表示越容易被吸附，保留时间越长，流出色谱柱就越慢。第11页/共68页

十二月2412（二）吸附剂1.对吸附剂的基本要求是：(1).具有较大的表面积和足够的吸附能力。(2).在所用的溶剂和洗脱剂中不溶解；不与试样各组分、溶剂和洗脱剂发生化学反应。(3).颗粒较均匀，有一定的细度，在使用过程中不易破碎。(4).具有较为可逆的吸附性，既能吸附试样组分，又易于解吸。目前最常用的吸附剂是硅胶和氧化铝，其次是聚酰胺、活性炭，还有大孔吸附树脂等。第12页/共68页

十二月24132.常用的吸附剂硅胶：多孔性微粒，表面带有硅醇基，呈弱酸性。原理:硅醇基(吸附中心)与极性基团形成氢键(吸附性),组分与硅醇基形成氢键(被吸附)的能力不同而分离。应用:酸性和中性物质的分离，如有机酸、酚类、醛类.第13页/共68页

十二月2414硅胶活度与含水量的关系：含水量高，活度低。活化：加热至100℃左右，除去吸附水提高活度分离效率：与其粒度及表面积等有关。常用硅胶：硅胶H，不含黏合剂硅胶G，含煅石膏硅胶GF254，含煅石膏和一种无机荧光剂，即锰激活的硅酸锌，在254nm紫外光下呈强烈黄绿色荧光背景。硅胶含水量%活性级别氧化铝含水量%0Ⅰ05Ⅱ315Ⅲ625Ⅳ1038Ⅴ15第14页/共68页

十二月2415氧化铝种类碱性氧化铝(pH9～10):适用于分离碱性或中性化合物酸性氧化铝(pH5～4.5):适用于分离酸性化合物中性氧化铝(pH7～7.5