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食品中氨基酸态氮检测方法汇总
第一法、酸度计法
一、原理
利用氨基酸的两性作用,加人甲醛以固定氨基的碱性,使羧基显示出
酸性。用氢氧化钠标准溶液滴定后定量,以酸度计测定终点。
二、试剂
除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的三
级水。
甲醛(36%~38%):应不含有聚合物(没有沉淀且溶液不分层)。
酚酞。
乙醇。
邻苯二甲酸氢钾:基准物质。
三、试剂配制
氢氧化钠标准滴定溶液[c(NaOH)-0.050mol/L]:经国家认证并授子标准
物质证书的标准滴定溶液或配制方法如下:
1、酚酞指示液:称取酚酞1g溶于95%的乙醇中,用95%乙醇稀释至100
mL。
2、氢氧化钠溶液[氯氧化钠标准滴定溶液c(NaOH)=0.05mol/L]:称取
110g氢氧化钠于250mL的烧杯中,加100mL的水,振摇使之溶解成
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饱和溶液,冷却后置于聚乙烯的塑料瓶中,密塞放置,澄清后备用。
取上层清液2.7mL加适量新煮沸过的冷蒸馏水至1000mL,摇匀。
3、氢氧化钠标准滴定溶液的标定:精确称取约0.36g在105℃~110℃
干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾,加80mL新煮沸过的水,使之尽量
溶解,加2滴酚酞指示液(10g/L),用氢氧化钠溶液滴定至溶液呈微红
色,30s不褪色。登记耗用氢氧化钠溶液毫升数。同时做空白试验。
C=m/(V1V2)0.2042(1)
式中:
c-氢氧化钠标准滴定溶液的实际浓度。单位为摩尔每升(mol/L);
m-基准邻苯二甲酸氢钾的质量。单位为克(g);
V1-氯氧化钠标准溶液的用量体积。单位为毫升(mL);
V2-空白试验中氢氧化钠标准溶液的用量体积。单位为毫升(mL);
0.2042--与1.00mL氢氧化钠标准滴定溶液[e(NaOH)=1.000mol/L]相当
的基准邻苯二甲酸氢钾的质量。单位为克(g)。
四、仪器和设备
酸度计(附磁力搅拌器)。
10mL微量碱式滴定管。
分析天平:感量0.1mg。
五、分析步骤
1、酱油试样
称量5.0g试样于50mL的烧杯中,用水分数次洗入100mL容量瓶中,加
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水至刻度,混匀后吸取20.0mL,置于200ml烧杯中,加60mL水,开
动磁力搅拌器,用氢氧化钠标准溶液[e(NaOH)=0.050mol/L]滴定至酸
度计指示pH为8.2,登记消耗氢氧化钠标准滴定溶液的毫升数,可
计算总酸含量。加入10.0mL甲醛溶液,混匀。再用氯氧化钠标准滴定
溶液连续滴定至pH为9.2,登记消耗氢氧化钠标准滴定溶液的毫升
数。同时取80ml水。先用氢氧化钠标准溶液[e(NaOH)=0.050mol/L]调
整至pH为8.2,再加人10.0mL甲醛溶液.用氢氧化钠标准滴定溶液滴
定至pH为9.2,做试剂空白试验。
2、酱及黄豆酱样品
将酱或黄豆酱样品搅拌匀称后,放入研钵中,在10min内快速研磨至
无肉眼可见颗粒,装人磨口瓶中备用。用已知重量的称量瓶称取搅拌
匀称的样品5.0g用50mL80℃左右的燕馏水分数次洗入100mL烧杯中,
冷却后,转人100mL容量瓶中,用少量水分次洗涤烧杯洗液并入容
量瓶中并加水至刻度混匀后过能。吸取滤液10.0mL置于200mL烧杯
中,加60mL水,开动磁力搅拌器,用氢氧化钠标准溶液
[e(NaOH)=0.050mol/L]滴定至酸度计指示pH为8.2登记消耗氢氧化钠
标准滴定溶液的毫升数,可计算总酸含量。加人10.0mL甲醛溶液混匀。
再用氣氧化钠标准滴定溶液连续滴定至pH为9.2登记消耗氯氧化钠
标准滴定溶液的毫升数。同时取80mL水,先用氢氧化钠标准溶液
[e(NaOH)=0.050mol/L]调整至pH为8.2再加入10.0mL甲醛溶液,用氢
氧化钠标准滴定溶液滴定至pH为9.2做试剂空白试验。
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六、分析结果的表述
试样中氨基酸态氨的含量按式(2)进行计算:
X=(V1V2)C0.0141
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