2.1.1植物细胞工程的基本技术（教学课件）高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3.pptx

第二章细胞工程第一节植物细胞工程人教版（2019）选择性必修三（一）植物细胞工程的基本技术

学习目标1.简述植物组织培养和植物体细胞杂交的原理和过程。(生命观念)2.“结合菊花的组织培养”的实验操作，尝试设计植物组织培养技术的流程简图。（科学探究）3.查阅资料，尝试探究植物生长素和细胞分裂素使用比例对植物组织培养的影响。(社会责任)

科技探索之路哈伯兰特提出了细胞全能性的理论，但相关的实验尝试没有成功。斯图尔德等发现胡萝卜的体细胞可以分化为胚，为细胞全能性理论提供了强有力的支持。科金用真菌的纤维素酶分解番茄根的细胞壁，成功获得了原生质体。古哈等在培养毛曼陀罗的花药时，首次得到了由花药中的花粉粒发育而来的胚。卡尔森诱导烟草种间原生质体融合，获得了第一株体细胞种间杂种植株。土壤农杆菌的Ti质粒被发现。之后，该质粒应用于植物分子生物学领域，促进了植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合。植物细胞工程的发展历程1902年1958年1960年1964年1971年1974年

课前导入“其茅葺，其叶青青，犹绿衣郎，挺节独立，可敬可慕。迨（dài）夫花开，凝晴滚露，万态千妍，薰（xūn）风自来，四坐芬郁，岂非入兰室乎！岂非有国香乎！”这是我国历史上第一部兰谱——《金漳（zhānɡ）兰谱》（宋·赵时庚）中对兰花的一段描述。从古至今，我国人民都把兰花看作高洁、典雅的象征，很多人喜欢养兰花。但是，兰花种子通常发育不全，在自然条件下萌发率极低；传统分株繁殖的方法又存在繁殖周期长、繁殖率低等问题，如果靠自然繁殖，兰花的价格可想而知了如何能让名贵的兰花大量、快速地繁殖，从而走入寻常百姓家呢？

一、植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。植物细胞具有全能性（1）什么是细胞的全能性？（2）细胞具有全能性的原因是什么？（3）为什么生物体内细胞并没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织器官？1.植物组织培养技术概念2.理论基础

一、植物组织培养技术细胞经过分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。3.全能性的概念叶子花瓣花粉细胞植物体原因高度分化的细胞仍含有该物种的全部遗传信息，具有发育成完整个体所需要的全套基因。

一、植物组织培养技术全能性大小的比较体细胞全能性与细胞的分化程度体细胞全能性与细胞分裂能力不同类型不同生物分化程度低的分化程度高的分裂能力强的分裂能力弱的受精卵生殖细胞体细胞受精卵干细胞体细胞植物细胞动物细胞

一、植物组织培养技术4.植物组织培养的基本流程根、芽脱分化再分化愈伤组织离体的植物器官、组织或细胞（外植体）如：胡萝卜的形成层、菊花幼茎段、月季的花药…细胞排列疏松且无规则、高度液泡化、不定形的薄壁组织团块已经分化的细胞，经过诱导，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程愈伤组织重新分化为芽、根等器官的过程完整植株生长发育

探究·实践菊花的组织培养一、植物组织培养技术材料用具：材料：幼嫩的菊花茎段、体积分数为70%的酒精，质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液和无菌水和培养基（p116）等。用具：50mL锥形瓶、烧杯、酒精灯、超净工作台（或接种箱）、高压蒸汽灭菌锅、培养箱、封口膜、滤纸、标签、消毒用酒精棉球、培养皿、解剖刀和镊子等。分裂旺盛，更容易诱导形成愈伤组织蔗糖：提供能源物质、维持渗透压。琼脂：固体培养基（不淹没缺氧；也不影响扎根）

探究·实践菊花的组织培养一、植物组织培养技术方法步骤：1.消毒双手和超净工作台酒精擦拭外植体（幼嫩的茎段）：酒精消毒30s无菌水2～3次次氯酸钠30min无菌水2～3次注意：实验使用的培养基和所有机械都要灭菌。接种操作必须在酒精灯火焰旁进行，并且每次使用后的机械都要灭菌。

探究·实践菊花的组织培养一、植物组织培养技术方法步骤：2.取材将消毒过的外植体置于无菌的培养皿中，用无菌滤纸吸去表面的水分。用解剖刀将外植体切成0.5～1cm长的小段。超净工作台无菌操作

探究·实践菊花的组织培养方法步骤：3.接种在酒精灯火焰旁，将外植体的1/3～1/2插入诱导愈伤组织的培养基中。用封口膜或瓶盖封盖瓶口，并在培养瓶上做好标记。接种外植体时，不要倒插！一、植物组织培养技术

探究·实践菊花的组织培养方法步骤：4.脱分化将接种了外植体的锥形瓶置于18～22℃的培养箱中培养。在培养过程中，定期观察和记录愈伤组织的生长情况。愈伤组织注意：诱导愈伤组织期间一般不需要光照。有光时，往往容易形成维管组织，而不易形成愈伤组织。一、植物组织培养技术

探究·实践菊花的组织培养方法步骤：5.再分化培养15～20天后，将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽的培养基上。长出芽后，再将其转接到