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抗-HIV酶联免疫检测的HOOK效应及对策

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.2007,Vo—

l9,No.2

抗一HIV酶联免疫检测的HOOK效应及对策

张国平王林韩惠云

【摘要】目的探讨ELISA双抗原夹L,~-HIVHOOK效应及对策.方法分别使用双

抗原夹心一步法,双

抗原夹心二步法检测抗HIV阳性高值标本及倍比稀释后的标本,比较结果的差异.

结果双抗原夹心一步法的HOOK效

应十分明显,双抗原夹心二步法无此现象.结论双抗原夹心二步法是减少HOOK

效应的有效方法.血站系统检测HIV抗

体时,至少应选用一种二步法试剂,以避免HOOK效应造成的强阳性标本漏检.

【关键词】HOOK效应ELISA无偿献血

【中圈分类号】R512.91R446.61【文献标识码】A【文章编号】

1671-2587(2007)02-0142-02

酶联免疫吸附试验(EIISA)具有高度的特异

性,敏感性,且操作简便,快速,无放射性污染,是采

供血机构筛查献血者传染性指标的主要检测手段.

目前检测抗一HIV的第3代ELISA试剂为双抗原夹

心法,按试验操作步骤分为一步法和二步法.由于

一

步法少了1个洗板及孵育过程,操作相对简便,

得到广泛应用.但在实际工作中,一步法易出现高

作者单位:454000河南省焦作市中心血站

作者简介:张国平(1963一),男,河南沁阳人,主管检验师,本

科,主要从事血站血液检验工作,(Te1)0391—28565ll.

剂量钩状效应(HD—HOOKeffect),从而导致假低

值,甚至假阴性¨.笔者将工作中发现的出现

HOOK效应的高值标本,选用双抗原夹心一步法

及二步法分别检测高值标本及倍比稀释后的标本,

探讨减少HOOK效应的对策,现报告如下.

对象与方法

1研究对象无偿献血者,女,3O岁,A型,首次

献血

2试剂初检试剂由上海科华生物工程股份有限

2跟踪临床反复输血的患者5例,在改良前,改良见表2.

后输注YRBC制品间隔时间的比较差异无显着性,

表2在改良前,改良后输注YRBC制品问隔时问统计

讨论

改良袋制备YRBC制品的主要操作技术指标

与常规制备法的差异无显着性(Pgt;0.05),改良

前,后制备的年轻红细胞在临床应用中输注间隔时

间的差异无显着性.应用临床5年的反馈良好.

该法避免了常规制备法中的开放性操作步骤,

使年轻红细胞的分离在一个完全密闭的管路操作

系统内完成,减少了污染,使制品的安全具有保障

同时,分离过程可在分离室内完成,减少工作人员

进入无菌间的次数,节省更衣,换鞋,开启净化台的

时间,提高了工作效率.

参考文献

1张小秋,王松云,邱新璐,等.手工法制备年轻红细胞的

体会EJ].江西医学检验杂志,1999,17(4):244.

2袁理.年轻红细胞的研制[J].中国输血杂志,1995,8

(4):180.

(收稿日期:2006—06—26)

(本文编辑.王敏)

临床输血与检验2007年4月箜!鲞箜塑

公司提供,双抗原夹心二步法,批复检

试剂由某进口生物有限公司提供,双抗原夹心一步

法,批号A45HA.以上试剂均在有效期内使用.

3仪器STAR全自动样本处理系统(瑞士

HAM1LTON公司);FAME全自动酶免分析系统

(瑞士HAMILTON公司);HTⅢ扫描酶标仪(奥地

利ANTHOS公司);MK2洗板机(芬兰Thermo公

司).

4方法将抗一H1v高值标本用生理盐水作倍比

稀释,并分别使用上述两种试剂检测高值标本及倍

比稀释后的标本,所有步骤均严格遵守操作规程.

结果

两种检测方法结果的比较见表1.

表1两种检测方法结果比较

讨论

ELISA双抗原夹心一步法反应体系中,待检

标本及酶标HIV抗原同时加入微孔中,会形成4种

产物:固相抗原一待测抗体～酶标抗原,固相抗原

一

待测抗体,待测抗体一酶标抗原,酶标抗原～待

测抗体一酶标抗原.其中只有固相抗原一待测抗体

一

酶标抗原是目的结合物,最后会催化底物,产生

反应信号;待测抗体一酶标抗原和酶标抗原一待测

抗体一酶标抗原会在洗涤过程中被去除.当标本中

待测抗体浓度过高时,由于竞争抑制作用,待测抗

体一酶标抗原,酶标抗原一待测抗体～酶标抗原结

合物相应增多,而固相抗原一待测抗体一酶标抗原

相应减少,于是反应显色减