2.2.1动物细胞培养课件-高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

第二章细胞工程第二节动物细胞工程人教版（2019）选择性必修三（一）动物细胞培养

学习目标1.运用稳态与平衡观，分析动物细胞培养的条件。(生命观念)2.用归纳与概括、演绎与推理等方法，用文字和图示说明动物细胞培养的过程。（科学探究）3.对干细胞培养用于人类疾病治疗等社会热点问题进行科学评价。(社会责任)

首例胚胎移植成功首创动物组织体外培养法发现哺乳动物精子获能现象体细胞核移植成功试管家兔诞生创立单克隆抗体技术胚胎分割移植成功分离和培养小鼠胚胎干细胞克隆羊多莉诞生获得诱导多能干细胞单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿诞生我国科学家首次培育了体细胞克隆猴1890年1907年1951年1958年1959年1975年1978年1981年1996年2006年2014年2017年动物细胞工程的发展历程

一、动物细胞培养的条件1、概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。2、目的：获得细胞或细胞产物；不能获得完整动物个体。3、原理：细胞增殖（有丝分裂）那么，动物细胞的培养需要哪些条件呢？动物体组织单个细胞细胞生长和增殖取出分散适宜条件

一、动物细胞培养的条件5糖类、氨基酸、无机盐、维生素…无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境充足的营养、稳定的内环境将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基含人类未知、细胞生长增殖所必需的物质，满足细胞对未知营养成分的需求。培养基的构成：合成培养基+血清等天然成分一般用液体培养基，也称为培养液

一、动物细胞培养的条件6糖类、氨基酸、无机盐、维生素…无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境①培养液、培养用具：灭菌处理；②无菌操作；③适量添加抗生素定期更换培养液，以便清除代谢物。①适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以_______________为宜；②适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为______________；③适宜的渗透压：________________________________维持细胞正常的形态和功能。36.5±0.5℃7.2-7.4

一、动物细胞培养的条件7糖类、氨基酸、无机盐、维生素…无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境维持培养液的pH95%空气+5%CO2的CO2培养箱O2：细胞代谢所必需CO2培养箱松盖培养瓶培养皿

二、动物细胞培养的过程悬浮培养的细胞:直接用离心法收集贴壁细胞:用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，用离心法收集取动物组织用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理分散成单个细胞解决悬浮生长贴壁生长(大多数）细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等接触抑制传代培养制成细胞悬液原代培养分瓶培养加培养液在培养皿或培养瓶内细胞分裂受阻②制成细胞悬液，分瓶培养①收集细胞

二、动物细胞培养的过程结合上图思考思考1.常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？说明细胞间的物质主要是蛋白质胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就失去活性，多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行。

二、动物细胞培养的过程结合上图思考思考2.用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理组织块，使组织分散成单个细胞的目的是什么？①使细胞与培养液充分接触，一方面保证细胞所需氧气和营养的供应，另一方面，另一方面保证细胞内代谢产物的及时排出。②使得在细胞水平操作的其他得以实现。思考3.实验过程中，胰蛋白酶处理时间过长，会出现什么结果？细胞膜的成分中含有蛋白质，而胰蛋白酶能够水解蛋白质，因此，胰蛋白酶会把细胞消化掉。因此，胰蛋白酶处理的时间不能太长。

二、动物细胞培养的过程结合上图思考思考4.观察发现，细胞进入培养瓶后并不立即生长，细胞发生了什么行为？黏附贴壁铺展贴壁生长（大多数）悬浮生长（如淋巴细胞）悬液中大多数分散的细胞很快就贴附在瓶壁上生长增殖，这种现象称为细胞贴壁。细胞能够悬浮在培养液中生长增殖

二、动物细胞培养的过程结合上图思考思考5.原代培养和传代培养的鉴定原代培养传代培养细胞株细胞系遗传物质改变遗传物质有的改变多数细胞固定在表面生长和分裂随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代培养危机：危机1危机2

二、动物细胞培养的过程区分两种“培养”的关键是看用胰蛋白酶处理的对象用胰蛋白酶对剪碎的动物组织进行处理，使其分散成单个细胞后进行培养，为原代培养。细胞培养过程中出现接触抑制，用胰蛋白酶使其从瓶壁上脱离下来，然后，将其分散到多个培养瓶中继续培养，为传代培养。第二次第一次

二、动物细胞培养的过程比较项目植物组织培养动物细