1.2.2微生物的选择性培养和技术（教学课件）高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3.pptx

第一章发酵工程第二节微生物的培养技术及应用人教版（2019）选择性必修三（二）微生物的选择培养和计数

学习目标1.过分析选择培养的原理，形成生物与环境相适应的观点。(生命观念)2.通过归纳总结微生物的分离及计数的常用方法，培养归纳与概括、分析与综合的科学方法。（科学思维）3.运用微生物分离及计数的常用方法，设计从土壤中分离分解尿素的细菌并进行计数的实验方案。(社会责任)4.运用微生物的选择培养与计数的方法，解决生产生活中的相关问题。(社会责任)

课前导入自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，更难实现。那么我们又如何达成这一目标呢？

一、选择培养基1.自然界中目的菌的筛选(1)实例：聚合酶链式反应(PCR)中用到的耐高温的DNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的中提取出来的。(2)依据：水生栖热菌能在的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。水生栖热菌70～80℃那么，如何从众多的微生物中筛选出单一菌种？启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。

一、选择培养基2.实验室中目的菌的筛选(1)原理：人为提供有利于生长的条件(包括营养、温度和pH等)，同时其他微生物的生长。(2)方法：利用选择培养基分离。选择培养基：允许的微生物生长，同时其他种类微生物生长的培养基。目的菌抑制或阻止特定种类抑制或阻止

一、选择培养基2.选择培养基（1）概念：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。（2）举例：①加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌；②缺乏氮源的培养基，可分离自生固氮微生物；③缺乏有机碳源的培养基，可分离自养微生物；④石油为唯一碳源的培养基，分离出能降解石油的微生物；⑤高盐培养基，可分离耐盐微生物。

一、选择培养基尿素施入土壤后，会被某些细菌分解成NH3，再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。这些细菌能合成脲酶，脲酶催化尿素分解产生NH3，再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。通常1g土壤中有几亿到几百亿个土壤微生物，其中细菌的数量最多，能分解尿素的细菌只是其中的一部分。结合材料思考1.如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？在选择培养基中，以尿素作为唯一氮源，只有能合成脲酶的细菌才能生长发育繁殖。

一、选择培养基尿素施入土壤后，会被某些细菌分解成NH3，再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。这些细菌能合成脲酶，脲酶催化尿素分解产生NH3，再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。通常1g土壤中有几亿到几百亿个土壤微生物，其中细菌的数量最多，能分解尿素的细菌只是其中的一部分。结合材料思考2.怎么证明一个选择培养基具有选择性呢？应该设置基础培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）或完全培养基作为对照，若对照培养基中生长的菌落数多于该选择培养基，则该选择培养基具有选择性。

二、微生物的选择培养1.选择培养基的作用：分离并计数某种微生物的数量（例如，能分解尿素的细菌）。2.微生物选择培养获取纯培养物的方法：由于土壤中细菌的数量庞大，要想得到能分解尿素的细菌的纯培养物，必须要对土样进行充分稀释，然后再将菌液涂布到制备好的培养基上，也就是要采用稀释涂布平板法。选择培养基+稀释涂布平板单菌落

二、微生物的选择培养3.稀释涂布平板法的操作过程：梯度稀释+涂布平板①铲取土壤，将样品装入纸袋中。②将10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的是试管中，依次等比稀释。1mL1ⅹ1071ⅹ1051ⅹ1061ⅹ1031ⅹ1021ⅹ1041mL1mL1mL1mL9mL无菌水1mL1mL90mL无菌水10g依次稀释10倍

二、微生物的选择培养3.取0.1mL菌液，加到培养基表面。4.将涂布器在盛有酒精的烧杯中。5.将涂布器放在火焰上，待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布。6.用涂布器将菌液均匀地在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。滴浸涂布灼烧

二、微生物的选择培养4.培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入30-37℃的温度下培养1-2d。在涂布有合适浓度菌液的平板上就可以观察到分离的单菌落。

二、微生物的选择培养与平板划线法相比，为什么稀释涂布平板法可以用于细菌的计数？平板划线法最开始的划线很可能菌类会长成一片，导致无法计数，此外灼烧接种环的时候也会杀死一部分菌类。

二、微生物的选择培养注意事项三注意事项四注意事项一注意事项二涂布器从酒精