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标题：乙型肝炎病毒表面抗原诊断（酶联免疫法）SOP文件版本号：修订号：
文件编号：生效日期：
编制人：审核人：发布部门：质量管理小组
乙型肝炎病毒表面抗原诊断（酶联免疫法）SOP文件
本试剂盒在微孔条上预包被纯化的乙肝表面抗体（HBsAb），配以酶标
记抗体（HBsAb-HRP）及TMB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清
（或血浆）中乙肝表面抗原（HBsAg）。
试剂盒组成：
名称48人份96人份480人份名称48人份96人份480人份
1、包被板条1块1块5块7、底物液A1瓶1瓶1瓶
2、酶标抗体1瓶1瓶1瓶8、底物液B1瓶1瓶1瓶
3、阳性对照1支1支1支9、终止液1瓶1瓶1瓶
4、阴性对照1支1支1支10、封板膜3张3张15张
5、样品稀释液1支1支1支11、自封袋1个1个1个
6、浓缩洗涤液1瓶1瓶1瓶12、说明书1份1份1份
操作步骤：
1.平衡：将试剂盒各组分从盒中取出，平衡至室温（18-25℃），微孔
板开封后，余者即时以自封袋封存。
2.配液：浓缩洗涤液配置前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗
涤液和蒸馏水或去离子水按1:19稀释后使用。
3.编号：取所需数量微孔条固定于支架，按序编号。
4.稀释：每孔加入20μl样品稀释液。
5.加样：分别在相应孔中加入100μl阴、阳性对照血清或待测样品。
6.温育：置37℃温育60分钟。
7.加酶：分别在每孔中加入酶标记抗体50μl。
8.温育：置37℃温育30分钟。
9.洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤后扣干（每次应保持30-60秒
的浸泡时间）。
10.显色：每孔加底物A、B各50μl，轻拍混匀，37℃暗置30分钟。
11.终止：每孔加入终止液50μl，混匀。
12.测定：用酶标仪单波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD
值（用单波长测定时，需用空白对照孔归零），并记录结果。
结果判定：
1、临界值（C.O.）=2.1×阴性对照孔OD平均值（阴性对照OD均值小
于0.05时以0.05计算）。
2、结果判定：
1）样本OD值S/C.O.≥1者为HBsAg阳性；反之，判为HBsAg阴性。
2）阴性对照OD均值0.1或阳性对照OD均值≤0.4时，实验无效，
应重新实验。
注意事项：
1.操作应按说明书严格进行。
2.所有样本、试剂和各种废弃物应按传染物处理。严格防止交叉感染，
严格健全和执行消毒隔离制度。对于含有传染源和怀疑含有传染源
的物质，应有合适的生物安全保证制度，下列为有关注意事项，但
不仅限于此：
1）戴手套处理样本和试剂。
2）不要用嘴吸样。
3）不可在处理这些物品时吸烟、进食、喝饮料、美容和处理隐形
眼镜等。
4）用消毒剂对溅出的样品或试剂进行消毒。
5）按当地的有关条例来消毒和处理所有样
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