番茄溃疡病菌检疫检测与鉴定方法.pdf

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1~Y/T2286-2012

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目。

在司

本体准按照GB1.l给出的规则起草。

本标准由农业部种植业管理司提出。

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会＜SAC/TC271）归门。

本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、贵州省植保植检站、贵州省植物保护研究所。

本标准主要起草人：王福祥、张忠民、袁洁、熊红利、吴石平、杨学辉、江兆春、耿坤、郑松、毛东、文lj新。

Y/T2286-2012

番茄溃殇病菌检疫检测与鉴定方法

1范围

本标准规定了农业植物检疫巾芯片日溃扬病菌检疫检测及鉴定的技术方法。

本标准适川下番柿溃殇病峭的检疫检测及鉴定。

2规范性引用文件

仅注日期的版本适用于本文

3

3.1

鸟眼斑

番茄T11t生、1鸟＂~状的病

斑。

3.2

渎殇斑

番茄戳£至红褐色粉

状的髓腔的

4原理

番茄溃殇病菌主要以带菌种

孔等自然孔r:1位

子远距离传播．出

人植株．造成局部佼眼斑”的典理为：5症

~ISA）以及聚合酶链式

状。该病原~为3番力

反应＜PCR＞检测结果是t

5试剂与材料

碳酸氢俐（Na11（.~（））、碳酬；芒，1c磷酸氢－：ii#i(\la_HP()＞、级化御

CKCl）、无水磷酸二氢仰（KIIPC)）、元水磷酸氢二仰（KIIPC)）、氯化纳＜NaCl）、无水亚硫酸纳

CNa2S03）、纸化筷CMgCh）、匕水硫酸钱CMgS(),•7H2C））、｛跚暇。13BO，＞等

DAS-El~ISA检测试剂（包被抗体、酶标抗体、包被缓冲液、PBST洗涤液、样品提取缓冲液、酶你抗

体缓冲液、底物对硝基苯磷酸二纳、底物缓冲液、终止液）与mSCM选择培养基制备方法参见附求B

除另有规定．所有试剂均为分析纯或生化试剂。实验用水1：在符合GB1T6682小一级水的规格

6仪器及用具

PCR仪、tl!.泳仪、凝胶成像系统、ftfij标仪、恒温侵荡仪、手？式离心机、高ffi灭l~；器、越净t作台、生化

而／T2286-2012

I持养箱、电子天平及Jtf也用于病害研究的实验室必备用具。

7取样方法

7.1田间植株取样

苗期至收获期~n＜£田间发现疑似症状（参见附录A＞.采jk病部3份～5份送实验穹鉴定。如未发

现疑似症状植除采灯j随机选点取佯．每