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细胞实验方法原理

一、细胞培养:

１。细胞培养:从活的机体中取出组织或细胞，分散成单个细胞,模拟机体内

的生长条件,在体外建立无菌、适温和一定营养条件等，使其在体外环境中

继续生长繁殖的过程，并维持其结构和功能的技术.

2.细胞培养的基本条件：无菌条件、细胞生长条件、细胞检测条件、细胞

保存条件.

3．无菌条件：

1）净化工作室：净化工作间是基于无菌条件下进行细胞培养操作的场所，

设计标准为万级，专供细胞培养、冻存以及细胞治疗用。...文档交流仅供

参考...

①细胞培养间：一般由

更衣间、缓冲间、操

作间三部分组成。每

周乳酸、过氧乙酸熏

蒸（2小时）和每月新洁尔灭擦拭地面和墙壁一次的方式进行消毒...文

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②洁净层流罩:层流罩是可提供局部高洁净环境的空气净化的设备。主要由

箱体、风机、初效空气过滤器、中效空气过滤器、高效空气过滤器、阻

尼层、灯具等组成。...文档交流仅供参考...

③传递窗：该装置是一种洁净室的辅助设备,主要用于洁净区与非洁净区之

间小件物品的传递，以减少洁净室的开门次数，把对洁净区的污染降

低到最低程度。...文档交流仅供参考...

④无尘服

层流净化细胞培养室的总体要求:经济、有序、高效、安全。

相关制度：

Ｉ.准入制度：没有经过培训的人员不得单独进入净化室工作。

进入净化室后要保持安静,不得大声喧哗.

II。安全制度：谨慎使用酒精灯,实验人员自觉维护室内设备的安全使用,对

室内的仪器如CO2孵箱等要经常注意机器运转情况，发现问题及时检

修或报告请人检修。离开时断开必要的仪器电源。...文档交流仅供参

考...

III。卫生消毒制度:一般情况下细胞间每天消毒一次,方法为紫外线消毒

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（每次30分钟至1小时）一次,另外每周用1０％乳酸在紧闭门窗下熏

蒸3０分钟；...文档交流仅供参考...

实验完毕应及时清理所用物品，注意台面整洁；层流净化室实施值日生

负责制。

IV．出入制度：总体原则为进出净化室应按次序开、关门,只有将前面打开

的门关闭后才允许打开下一个门，使缓冲间起到应有的作用文档交流

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所有进出层流净化细胞培养室的物品均应通过传递窗进行，紫外灯照

射15分钟

2）无菌操作的仪器设备:

①超净工作台：工作原理是利用鼓风机驱动空气经过高效滤器除去空气中

的尘埃颗粒，使空气得到净化.净化空气徐徐通过工作台面,使工作台内

构成无菌环境。...文档交流仅供参考...

使用前开启柜内紫外灯照射１0—30分钟,预工作10—15分钟，以除去

臭氧和使用工作台面空间呈净化状态。使用完毕后，要用70％酒精将台

面和台内四周擦拭干净。...文档交流仅供参考...

②生物安全柜:既能使操作造成无菌、无尘的局部空气环境，保证检验、检

测不受污染，又能保证被研究的对象(如病菌、细菌等)不外溢,保护周围

环境及操作人员安全。广泛应用于低、中等危险度(病原体1-—3，DNA

重组Ｐ１－－P3）的临床细菌学，病毒学、微生物学、组织培养、生物

学及生命科学的研究，加工、检验部门。...文档交流仅供参考...

③高压灭菌锅：121℃，20min，适用于耐高温耐高压，不怕潮湿的物品(器

械、细菌培养基等)

④电热干燥箱:干热消毒，主要用于玻璃器皿消毒。

⑤紫外线：主要用于培养室空气、操作台、塑料培养皿和培养板等表面消

毒.

⑥过滤除菌设备：