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化学性肝硬化动物模型造模方法
主要内容肝硬化造模方法种类简介机理分析、给药途径、剂量、优缺点展望与思考
肝硬化造模的主要方法化学性肝硬化模型结扎胆总管肝硬化模型实验性免疫肝硬化模型血吸虫虫卵所致肝硬化模型转基因肝硬化模型复合法
化学性肝硬化模型四氯化碳法01二甲基亚硝胺02二乙基亚硝胺03硫代乙酰胺04
化学性单纯CCL4法
机理分析肝纤维化、肝硬化CCl3-与肝细胞内大分子发生共价结合,破坏肝细胞功能CCl4通过肝微粒体细胞色素P450氧化酶激活后,产生自由基CCl3-及Cl
化学性单纯CCL4法
给药途径腹腔注射法高死亡率皮下注射法灌胃四氯化碳致肝纤维化动物模型实验条件的优化国外腹膜炎1234
给药剂量吴孟超经典模式40%~60%CCl4橄榄油溶液皮下注射,0.3mL/100g体重,首剂加倍,每周2次,共8~12周不同剂量四氯化碳实验中，0.1mL/100g剂量最佳
模型特点：简便,费用低，易操作动物个体差异较大,CCl4剂量不易掌握停药后易逆转
化学性CCL4复合法CCL4苯巴比妥联合诱导01CCL4食用乙醇联合诱导02
CCL4苯巴比妥联合诱导机制四氯化碳诱导慢性肝损伤的机理是直接损害肝细胞,破坏细胞的各种成分,造成肝细胞的脂肪变性与坏死苯巴比妥钠通过提高细胞色素P450活性,从而增加肝细胞对四氯化碳的敏感性
CCL4苯巴比妥联合诱导
给药途径01苯巴比妥：饮水中给药02四氯化碳：背部皮下注射
CCL4苯巴比妥联合诱导
给药剂量添加标题第一周每升蒸馏水中含0.35g苯巴比妥钠的溶液作为大鼠的惟一饮用水添加标题第二周起按0.4mL/100g体重注射，每周2次，共10周
CCL4食用乙醇联合诱导-----机制乙醇:酶诱导剂增加肝氧耗量增强四氯化碳对肝的毒性作用四氯化碳:直接损害肝细胞破坏细胞的各种成分促进肝硬化的形成
CCL4食用乙醇联合诱导
给药途径01乙醇：灌胃或饮水中给药02四氯化碳：皮下注射
CCL4食用乙醇联合诱导
给药剂量缩短时间成型率高死亡率低60%四氯化碳，30%乙醇溶液诱导,共9周改良的诱导方法1981年Chatamra采用50%四氯化碳、10%乙醇为主的方式建立肝硬化模型,诱导时间约12周目前标准的诱导方法
CCL4复合法
模型特点动物模型周期缩短形成率低拒饮苯巴比妥或乙醇导致脱水、死亡胃大出血而死亡
二甲基亚硝胺(DMN)
二甲基亚硝胺(DMN)机理肝微粒体01DMN02中间产物甲醛、甲烷亚硝胺03核酸、蛋白质04肝细胞损伤05＋06
二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射给药途径
二甲基亚硝胺(DMN)
给药剂量王献波等人,以DMN10μg/kg剂量做腹腔内注射,每天1次,每周连续3天、共4周，成功形成肝硬化模型%DMN按1ml/kg腹腔注射，每周前3天给药，每天1次，持续3周，第4周仅在周一给药1次，成功形成肝硬化模型12
二乙基亚硝胺(DEN)
机理01DEN02DNA双链03DNA编码错译04肝脏损伤
二乙基亚硝胺(DEN)给药途径：饮水中给药
二乙基亚硝胺(DEN)
给药剂量给药剂量：★0.1g/L★0.05g/L、2周后为0.1g/L诱导8周两者的肝硬化严重程度无统计学差异[1]华赟鹏,李绍强,赖佳明,彭宝岗,梁惠珍,梁力建.体重监测下渐进性口服二乙基亚硝胺诱导肝硬变大鼠模型的研究[J].中国普外基础与临床杂志,2009,(8).
TAA（硫代乙酰胺）
机制肝01TAA02硫氢03化合物04肝大分05子物质06引起肝细胞膜损害07肝细胞坏死08
TAA（硫代乙酰胺）
给药途径剂量给药途径：饮水中给药给药剂量：生理盐水配制成30％溶液，作为实验动物的饮用水，8周形成肝硬化
致癌药物造模（除CCL4）
模型特点慎用周期短，死亡率相对较低毒性大，易挥发，排泄物在24小时内含有毒性，易污染环境需做好隔离，造模过程不方便硫代乙酰胺（TAA）在组织学上所诱导的肝硬化与病毒性诱发的肝硬化很相似共性：个性：
感悟与思考因素探讨：多因素诱导法是否优于单因素诱导法？鼠较成熟，但是在兔、狗等中型动物身上是否相同？药物的剂量：文献中发现无论是鼠还是兔，都存在四氯化碳给药剂量相差10倍的问题，是小剂量还是大剂量应该在造模过程中采用？
前期预实验动物：新西兰兔造模药物：四氯化碳、乙醇造模方法：四氯化碳复合法（四氯化碳2.5ml/kg乙醇5ml）单纯四氯化碳法(0.3ml/kg)给药途径：四氯化碳皮下注射、乙醇灌胃造模结果：1、单纯法四氯化碳造模成功率100%
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