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BIOTECHNOLOGYBULLETIN

2011年第3期

高温蛋白酶产生菌的筛选及其产酶条件和酶学性质分析

廉立慧

高丽君王德才张显忠李艳玲

(泰山医学院生物科学系,泰安271000

摘

要:

从徂徕山温泉附近土样中分离到9株产高温蛋白酶菌株,选取一株碱性蛋白酶

高产菌株L7为出发菌株,进行

显微形态、16SrRNA基因序列分析,将其初步鉴定为短芽孢杆菌(Brevibacillus

sp．。研究该菌株发酵条件,确定产酶的最佳培养基组成为葡萄糖40g/L,蛋白胨

20g/L,磷酸氢二钠1．4g/L,氯化钙0．6g/L,硫酸镁0．4g/L,通过培养基优化,酶

活达到103．08U/mL。最佳培养条件为250mL三角烧瓶中装液量50mL、

pH8．0、培养温度为55ħ、培养时间为24h。对该菌株酶学性质研究,L7菌株所产

高温蛋白酶的最适温度为55ħ最,适pH为10,并且具有良好的温度稳定性和pH稳定

性,酶活性受PMSF强烈抑制。

关键词:

短芽孢杆菌

高温蛋白酶

发酵条件

酶学性质

ScreeningofThermostableProtease-producingBacteriumand

AnalysisofFermentationConditionsandProteaseProperties

LianLihui

GaoLijun

WangDecai

ZhangXianzhong

LiYanling

(DepartmentofBiologicalSciences,TaishanMedicalCollege,Taian271000

Abstract:

Ninethermophilicbacterialstrainswiththermophilicproteaseactivitywere

collectedfromthesoilaroundahotspring

inMountainCulai．Thestrainwhichshowedhighproteaseactivitywasselectedfor

proteaseassayandnamedasL7．Basedonmorpho-logicalcharacteristicsand16S

rRNAgenesequenceanalysis,

strainL7wasidentifiedasBrevibacillussp．．Theoptimalmediumcom-ponents

wereglucose40g/L,peptone20g/L,Na2HPO41．4g/L,CaCl20．6g/L,MgCl

20．4g/L．Theproteaseactivitycanachieve103．08U/mLthroughthemedium

optimization．Theoptimalcultureconditionswere50mLmediumin250mLErlenmeyer

flask,ini-tialpH8．0,at55ħfor24h．Enzymaticpropertiesshowedthattheenzyme

optimaltemperatureis55ħ,optimumpH10.0．Theen-zymeexhibitedhighthermal

stabilityandstableatawiderangeofpH,anditsactivityisintensivelyconstrainedby

PMSF．

Keywords:

Brevibacillussp．ThermophilicproteaseFermentationconditionEnzymatic

properties

收稿日期:2010-08-24

基金项目:泰山医学院青年基金项目

作