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常用化学发光免疫分析技术比较

1、化学发光免疫分析

化学发光免疫分析（chemiluminescenceimmunoassay,CLIA）,

英音：[,kemi,lju:minesans][,imju:n0uo*sei]

是将具备高敏捷度化学发光测定技术与高特异性免疫映相结

合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药

物等检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间

辨别荧光免疫分析之后发展起来一项必威体育精装版免疫测定技术。

CLIA是将具备高敏捷度化学发光测定技术与高特异性免疫映

相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素

和药物等检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和

时间辨别荧光免疫分析之后发展起来一项必威体育精装版免疫测定技术。

1.1、化学发光免疫分析原理

化学发光免疫分析包括两个某些，即免疫映系统和化学发光分

析系统。化学发光分析系统是运用化学发光物质经催化剂催化和氧化

剂氧化，形成一种激发态中间体，当这种激发态中间体回到稳定基态

时，同步发射出光子（hv）,运用发光信号测量仪器测量光量子产额。

免疫映系统是将发光物质在（映剂激发下生成激发态中间体）直

接标记在抗原化（学发光免疫分析）或抗体免（疫化学发光分析）上，

或酶作用于发光底物。

1.2、化学发光免疫分析类型

化学发光免疫分析法以标记办法不同而分为两种：

⑴化学发光标记免疫分析法；

⑵酶标记、以化学发光底物作信号试剂化学发光酶免疫分析法

1.2.1化学发光标记免疫分析

化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CLIA),是用化

学发光剂直接标记抗原或抗体免疫分析办法。惯用于标记化学发光物

质有口丫咤酯类化合物a・cidiniumeste(AE),是有效发光标记物，其

通过起动发光试剂(NaOH-HzCh)作用而发光，强烈直接发光在一秒

钟内完毕，为迅速闪烁发光。口丫咤酯作为标记物用于免疫分析，其化

学映简朴、迅速、不必催化剂；检测小分子抗原采用竞争法，大分

子抗原则采用夹心法，非特异性结合少，本底低；与大分子结合不会

减小所产生光量，从而增长敏捷度。

1.2.2化学发光酶免疫分析

从标记免疫分析角度，化学发光酶免疫分析(chemiluminescent

enzymeimmunoassay,CLEIA),应属酶免疫分析，只是酶映底物

是发光剂，操作环节与酶免分析完全相似：以酶标记生物活性物质(如

醮标记抗原或抗体)进行免疫映，免疫映复合物上酶再作用于发

光底物，在信号试剂作用下发光，用发光信号测定仪进行发光测定。

当前惯用标记酶为辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(ALP),它

们有各自发光底物。

12.2.1HRP标记CLEIA

惯用底物为鲁米诺(3•氨基邻苯二甲酰肿,luminol),或其衍生物

如异鲁米诺(4.氨基邻苯二甲酰脱)，是一类重要发光试剂。其构造如

图4所示。鲁米诺氧化映在碱性缓冲液中进行，在过氧化物酶及

活性氧过［氧化阴离子(0,，单线态氧(102),羟自由基(0H・),

过氧化氢(H2O2)］存在下，生成激发态中间体，当其回到基态时发光，

其波长为425nm。

初期用鲁米诺直接标记抗原(或抗体)，但标记后发光强度减少

而使敏捷度受到影响。近来用过氧化物酶标记抗体，进行免疫