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细胞工程:是指以细胞为对象,应用生命科学理论,借助工程学原理
与技术,有目的地运用或改造生物遗传性状,以获得特定的细胞、组
织产品或新型物种的一门综合性科学技术。
细胞培养的操作方式有:分批式培养(batchculture),流加式培养
(feedingculture),半连续式培养(semi-continuousculture),连续式
培养(continuousculture),灌流式培养(perfusionculture)
分批式培养(batchculture),细胞和培养基一次性加入培养容器中,
待细胞增长和产物积累到适当时间,一次性收获细胞、产物和培养基
的方法。
流加式培养(feedingculture)在分批培养的过程中,间歇或连续补加
一种或多种培养成分的培养方法。一般接种体积为容器总体积的
1/2-1/3。可分为单一补料和反复补料两种类型。
半连续式培养(semi-continuousculture),反复分批式培养或换液培
养。在培养过程中,每间隔一段时间从中取出部分培养基和细胞(一
般取出1/4-1/2体积),再用新的培养液补足到原有体积,使培养容
器内的原有体积不变。
连续式培养(semi-continuousculture),在培养过程中以一定速度连续
不断地加入新鲜培养液,并以同样速度收获具有细胞的培养液,以保
持培养体积的恒定。
灌流式培养(perfusionculture),在培养过程中,不断补充新鲜培养液,
同时回收本来的培养液,细胞保存在培养容器中。
植物无性繁殖过程中器官发生方式:不定芽型,器官型,器官发生型,
胚状体型,原球茎型。
胚状体:是在组织培养中分化产生的具有芽端和根端,类似合子胚
的结构。
细胞分化和形态建成
途径一:外植体→愈伤组织→分生细胞团→不定芽或不定根→完整小
植株
途径二:外植体→顶芽或腋芽(无菌扦插)→不定根→完整小植株
途径三:外植体→愈伤组织→胚状体→完整小植株
途径四:茎尖或侧芽→原球茎→毛状假根→完整小植株
培养基的配制
成分:大、微、铁、有、糖、琼、激、pH、其他
配制:
1、配制储备液。
2、先加约3/4的蒸馏水,再加琼脂和糖,煮至琼脂溶化,注意搅拌,
勿使沸出。
3、加储备液(大、微、铁、有)、激素及其他成份。
4、定容至110%(通常情况下)。
5、充足搅拌,调pH,检查是否漏掉。
6、分装至培养容器中,盖好覆盖物。注意不时搅动,勿使培养基沾
污培养容器开口。
7、高压灭菌后取出,冷至室温即可使用。
(若需加入高温高压下易分解的物质?)
人工种子又称合成种子或体细胞种子:指将植物离体培养中产生的胚
状体或芽包裹在具有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成
的类似种子的颗粒。(人工种子又称合成种子或体细胞种子,是一种
具有植物胚状体或芽、营养成分、激素以及其他成分的类似于种子结
构的人工胶囊)
人工种子的优势
❖体积小,结构完整,便于贮存和运送。
❖繁殖速度快,数量大,效率高。
❖成本低于试管苗,便于机械化播种。
❖人工胚乳可根据不同植物的规定配制,可加入适量营养物、激
素、有益微生物、抗病抗虫成分,使人工种子优于天然种子。
❖可作为植物基因工程和遗传工程的载体
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