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链球菌检验作业指导书

1主题内容与适用范围

本作业指导书规定了链球菌的检验方法。

本作业指导书适用于患者的生物样品(如:尿液、脓液、脑脊液、痰等)及医院物体表面涂抹

样本及使用中消毒剂链球菌的检验。

2引用标准

GB/T4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂

全国临床检验操作规程(第三版)

临床微生物学诊断与图解(第二版)周庭银编著

3设备和材料

3.1无菌棉拭子。

3.2无菌5cm×5cm规格板。

3.3温箱:36±1℃,42℃。

3.4显微镜。

3.5灭菌广口瓶:500mL。

3.6灭菌三角烧瓶:500mL,250mL。

3.7灭菌吸管:10mL、1mL。

3.8天菌平皿:90mm×15mm。

3.9灭菌小试管:内径3mm,长5cm。

3.10灭菌毛细管。

3.11无菌注射器:5mL、10mL

3.12橡皮乳头。

3.13载玻片。

3.14酒精灯。

3.15灭菌金属匙或玻璃棒。

3.16接种棒、镍铬丝。

3.17试管架、试管篓。

4培养基和试剂

4.11%葡萄糖肉汤:按GB/T4789.28中4.1规定。

4.2血琼脂平板:按GB4789.28中4.6规定。

4.3SCDLP液体培养基:按卫生部《消毒技术规范》附录A.23中规定。

4.4麦康凯琼脂:按GB4789.24中4.4规定。

4,56.5%氯化钠肉汤:见附录A1。

4.6马尿酸钠培养基:按GB/T4789.28中3.9规定。

4.7过氧化氢酶试验:按GB4789.28中3.21规定。

4.8蛋白胨水、靛基质试剂:按GB4789.28中3.13规定。

4.9氨基酸脱羧酶试验培养基:按GB4789.28中3.12规定。

4.10糖发酵管:按GB4789.28中3.2规定。

4.11溶血性检查:见附录A1。

4.12杆菌肽敏感试验:见附录A4。

4.13CAMP试验:见附录A5。

4.14胆汁-七叶苷试验:见附录A6

4.156.5%NaCl生长试验:见附录A7。

4.16Optochin敏感试验:见附录A3

4.17吡咯烷酮芳氨酶(PYRase)试验:见附录A9。

5检验程序:见图1

图1:链球菌检验程序

食物中涂抹拭子、使用中的消

尿液、脓液、痰等

毒标本毒剂用相应中和剂肉汤

中和后取5mL

1%葡

涂血平板36℃±1℃萄糖肉

镜平板18~24h汤增菌

36℃±1℃18~24h

挑选具有α、β或γ溶血环的可疑

菌落转种血琼脂平板分纯培养。具有γ溶血环的菌落

进行涂片染色镜检

36℃±1℃18~24h

具有β溶血环的菌落具有α溶血环的菌落触媒阴性、革兰氏阳

进行涂片染色镜检进行涂片染色镜检性链状或单个排列

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