生物制品制造新技术.ppt

（三）单链抗体（single-chainantibody)即FV分子或单链抗体蛋白：由VL区氨基酸序列与VH区氨基酸序列经肽连接物（linker）连接而成。（此外肽连接物还可将药物、毒素或同位素与单链抗体蛋白相融合。）相对分子质量小，作为外源性蛋白的免疫原性较低；在血清中比完整的单克隆抗体或F(ab)2片段能更快地被清除；无Fc片段，体内应用时可避免非特异性杀伤；能进入实体瘤周围的微循环等优点。第63页,共71页，星期六，2024年，5月（四）Ig相关分子将抗体分子的部分片段（如V区或C区）连接到与抗体无关的序列上（如毒素），制成Ig相关分子。例如将有治疗作用的毒素或化疗药物取代抗体的Fc片段，通过高变区结合特异性抗原，连接上的毒素可直接运送到靶细胞表面，起“生物导弹”的作用。Byrn的“CD4免疫黏附素”将CD4基因与IgG1C区在体外重组而表达出的Ig相关分子，可封闭人HIVgp120蛋白与CD4+T细胞的结合，治疗艾滋病上具有潜在价值。第64页,共71页，星期六，2024年，5月（五）噬菌体抗体（phageantibody)将已知特异性的抗体分子的所有V区基因在噬菌体中构建成基因库，用噬菌体感染细菌，模拟免疫选择过程，具有相应特异性的重链和轻链可变区即可在噬菌体表面呈现出来。即噬菌体表面展示技术（phagedisplaytechnology)。第65页,共71页，星期六，2024年，5月第66页,共71页，星期六，2024年，5月（六）全套抗体（theimmunoglobulinrepertoire）基因库即抗体基因文库。从构建的人和动物抗体基因总文库中筛选和表达针对任一抗原的抗体基因，将结束仅依靠免疫获得抗体的状况。第67页,共71页，星期六，2024年，5月催化抗体（catalyticantibody)一、概念:也叫抗体酶（abzyme)，是具有催化活性的免疫球蛋白，兼具抗体的高度选择性和酶的高效催化性。1986年Lerner和Schultz两个研究小组第一次发文：抗体酶的研究取得成功。第68页,共71页，星期六，2024年，5月二、制备抗体与处于稳定、低能构型的抗原作用，酶与处于不稳定、高能的过渡态底物结合。酶结合能量帮助打开底物分子的化学键。抗体酶的结构应该与底物过渡态互补。但这种过渡态往往只存在短时间，所以研究者必须先制备底物过渡态的稳定低能类似物，然后制备抗体酶。制备催化抗体的4种方法。第69页,共71页，星期六，2024年，5月1．细胞融合法抗原：载体蛋白+半抗原。免疫鼠，制备单抗。例子：催化碳酸脂水解的抗体。2．抗体结合位点化学修饰法在抗体结合位置（或者附近）引入具有催化功能的基团。如催化碳酸脂水解的抗体的结合部引入亲核性巯基，其催化香豆酯水解的速度提高6万倍。3．引入辅助因子法将金属离子引入抗体。4．基因工程抗体技术第70页,共71页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第71页,共71页，星期六，2024年，5月五、基因芯片DNA芯片（DNAchip),DNA微阵列（DNAmicroarray)、寡核苷酸微芯片（oligonucleotidemicrochip)指将许多特定的寡核苷酸片段或基因片段作为探针，有规律地排列固定于支持物上，然后与待测的标记样品中的基因按碱基配对原理进行杂交，再通过激光共聚焦荧光检测系统等对芯片进行扫描，并配以计算机系统对每一探针上的荧光信号作出比较和检测。第31页,共71页，星期六，2024年，5月20世纪90年代初，美国Fodor博士提出并研究。用于基因表达谱分析、新基因的发现、基因突变与多态性分析、基因组文库作图、疾病的诊断与预测、药物筛选，以及司法与刑侦、环境与食品卫生监督等。六、其它技术核苷酸序列分析、多位点酶电泳等。第32页,共71页，星期六，2024年，5月第三节、抗体工程技术多克隆抗体

(Polyclonalantibody)一.概念给动物接种抗原所获得的免疫血清或抗血清是多种抗体的混合物,它是由多种抗原决定簇刺激多株B细胞增殖分化所产生的,称为多克隆抗体。第33页,共71页，星期六，2024年，5月二.多克隆抗体的应用免疫学检测被动免疫治疗和紧急预防三.存在问题特异性差,用于免疫学检测容易出现交叉反应第34页,共71页，星期六，2024年，5月单克隆抗体

(Monoclonalantibody,McAb)一