皮肤科免疫荧光技术.pptVIP

皮肤科免疫荧光技术河北医科大学第二医院皮肤科郭兵申1将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体（或抗原）上，与其相应的抗原（或抗体）结合后，在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。原理直接法：将荧光素标记的抗体与标本中的抗原直接结合进而荧光反应。间接法：将荧光素标记的抗抗体与相应的特异性抗体抗原复合物反应，形成抗原-抗体-抗抗体复合物体系，进检测的一种特异性荧光反应。分类2免疫荧光技术概述免疫荧光原理示意图λ吸=550nm、λ发=620nm、呈橙红色荧光异硫氰酸荧光素（FITC）λ吸=490--495nm、λ发=520--530nm、黄绿色荧光四乙基罗丹明（RIB200）λ吸=570nm、λ发=595～600nm、呈橘红色荧光四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）030405060102临床常用荧光素染料适应症：1非感染性大疱性皮肤病2天疱疮、类天疱疮、疱疹样皮炎、线状IgA大疱性皮病、获得性大疱性表皮松解等3结绨组织病：如红斑狼疮等4各种血管炎5皮肤肿瘤6某些感染性皮肤病7皮肤直接免疫荧光检测?血清中各种抗微生物抗体测定如：梅毒螺旋体、支原体、衣原体、立克次体、疱疹病毒等?血清中各种自身抗体的测定系统性疾病：如红斑狼疮、皮肌炎、硬皮病等大疱性皮肤病：如天疱疮抗体等糖尿病：如抗胰岛细胞抗体等?适应症：皮肤间接免疫荧光检测操作方法及流程放入生理盐水送检手术取材?外观正常未受累皮肤?直径1-2mm带疱皮损（米粒大小水疱）?直接荧光患者标本采集操作方法及流程冰冻切片、染色、镜检组织修材，成适合冰冻包埋块的大小冰冻切片抗原与荧光抗体结合荧光显微镜下镜检及成像，打印报告操作方法及流程操作方法及流程间接免疫荧光染色步骤实验室操作图片直接荧光组织修材冰冻切片实验室操作图片荧光染色水浴箱孵育实验室操作图片荧光显微镜镜检