植物工厂化育苗教学课件 8生根培养.pptxVIP

生根培养——植物工厂化育苗

继代接种切割顶芽或腋芽萌发伸长形成多节茎段嫩枝，剪成带1-2枚叶片，带一个芽或几个芽的一两个节间。遗传稳定。丛生芽可以先分成单株进行接种，培养成明显茎段的壮苗后按正常方式接种即可

通过继代培养，材料增殖到一定数量后，部分培养物进入壮苗和生根过程。进一步在生根培养基上诱导生根，才能得到完整的植株。继代培养过程中细胞分裂素浓度增加有助于芽的分化和增殖，从而有助于增殖系数提升。但芽的分化增殖会伴有生长势减弱，芽，茎细弱等现象。这种苗移栽成活率低。必须经过壮苗。生根培养有试管内生根和试管外生根两种方式。

（一）试管内生根试管瓶内生根是指将长到一定长度的微枝（大于10mm）转移到生根培养基上继续培养。

1．试管苗根的形成类型及生长（1）试管苗根的类型植物离体培养产生的根为不定根，不定根又分为皮部根和愈伤根两种类型。皮部根：维管束一般是与茎的维管束连通的，疏导组织连通，营养成分和水可以顺利在植物体内运输。愈伤组织形成的根与茎的疏导组织不连通。尤其是容易产生愈伤组织的植物（如刺槐）的试管苗生根，输导组织不通是试管苗根系质量的主要问题，也是限制移栽的主要因子。

（2）根的生长试管苗生根的时间长短不相同，草本植物一般较快，木本稍慢。一般形成根源基1周后即能长出明显的根，其颜色为白色，有的短粗，有的细长。较好的根为白色较粗的小短根成活率较高。根在培养基中盘根错节的生长，一段时间后逐渐由白色变成黄色，甚至褐色，根开始老化。此时其吸收能力明显降低，移苗成活率也低。

2．生根的影响因素（1）植物材料的影响不同植物及同一植物不同基因型、不同材料和不同年龄对根的产生都有影响。扦插生根容易的植物，试管苗生根也容易。扦插生根难的植物，试管苗生根也难，如核桃、板栗等。植物生根的规律是：成年的比幼年的树难生根；木本植物比草本植物难生根；乔木比灌木难生根。

（2）培养基的影响试管苗生根是从异养状态进入自养状态的一个变化。利用根系吸收营养和水分是植物本能。培养基中浓度较高的营养元素及糖可使试管苗产生依赖性而不易生根，减少营养成分及糖的浓度即可刺激生根。培养基中的一些无机盐成分不利于根的产生，要适当降低无机盐浓度才有利于根的分化。植物激素中生长素有促进根的分化的作用。一般可以用IBA、IAA、NAA等药品单独或者混合使用。胚轴、茎段、花梗等材料分化。根使用IBA居多，浓度为0.2-10.0mg/L，其中以1.0mg/L为多。生根培养时生长素含量也要适当降低。细胞分裂素对生长素有拮抗作用，能抑制根的形成。

（3）培养条件的影响 温度、光照对发根都有很大的影响。一般诱导生根所需要的温度比增殖培养的温度要适当低一些，继代培养时适宜温度为25-28℃，生根适宜温度20-25℃左右。温度低于15℃，影响根分化生长，温度高于30℃，根的质量变差、数量减少，且出现徒长现象，移栽成活率会大大降低。大多数植物光照不抑制根原基的形成和生长，用普遍的正常光照下培养即可。

3．生根培养基配制原则（1）降低继代培养基中无机盐的浓度。一般MS大量母液减半或1／4；（2）去掉原培养基中细胞分裂素成份；（3）降低蔗糖浓度（如减半）（4）适当浓度的生长素；（5）适当增加琼脂浓度；--一般增加琼脂浓度，增加吸水难度，加强自养，诱导生根能力（6）对有些植物可适当加些吸附剂（如活性炭），有促进生根的作用。例如：花楸继代培养基：MS＋BA2mg/L＋IBA0.2mg/L+2%蔗糖+0.55%琼脂花楸生根培养基：1/2MS＋IBA1.0mg/L+1%蔗糖+0.7%琼脂

4．转接方法高度在1cm长以上的较为粗壮的芽苗可进行生根培养。不足1cm的芽苗及愈伤组织用于继代培养。继代无菌芽苗在超净台上拿出后，芽丛纵向切成单株，将分离得到的单株植物的基部愈伤组织切掉，按形态上下极插入生根培养基中进行培养。

（二）试管瓶外生根试管外生根是将组培苗的生根诱导同驯化培养结合在一起，直接将组培苗扦插到试管外有菌环境中，边诱导生根边驯化培养。试苗一般都在试管内生根。对于一些较容易生根的植物，如杨树，菊花、康乃馨、月季、樱桃等树种可以从试管内取出进行试管外生根，这样把生根和驯化过程结合起来，既可大幅度降低成本，又可提高移栽成活率。

1．试管瓶外生根方法（1）诱导出根源基后再扦插（2）生长素处理法

（1）诱导出根源基后再扦插将继代丛生芽转接到生根培养基中进行培养，可插的密些，培养十天左右可见嫩茎基部明显产生根源基时取出，移栽到事先准备好的穴盘里进行培养。

（2）生长素处理法将无根的试管苗取出后，用生长素溶液浸泡一小时或蘸生根粉后进行扦插。用生长素浓度一般比诱导生根培养基大10倍左右。草本可用IAA5mg/L＋NAA1mg/