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胃蛋白酶的制备工艺流程

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胃蛋白酶是一种消化酶，主要在胃中发挥作用，用于分解蛋白质。其制备工

艺流程主要包括以下几个步骤：

1.原料选择：选择新鲜的动物内脏，如猪、牛的胃黏膜，作为原料。要求

原料新鲜、无病变、无污染。

2.原料处理：将新鲜的内脏清洗干净，去除杂质，然后切成小块。

3.匀浆：将处理好的内脏块放入匀浆机中，加入适量的缓冲液（如

0.05mol/L的磷酸盐缓冲液），进行匀浆处理。匀浆过程中，要保持温度在4℃

左右，以保持酶的活性。

4.离心：将匀浆后的混合物转移到离心机中，以3000rpm的速度离心10

分钟。离心后，弃去沉淀，取上清液。

5.盐析：在上清液中加入适量的硫酸钠溶液（如0.3mol/L的硫酸钠溶液），

使蛋白质发生盐析。盐析过程中，要保持温度在4℃左右。盐析后，再次离心，

弃去沉淀，取上清液。

6.凝胶过滤：将上清液通过凝胶过滤柱（如SephadexG-25）进行过滤。

过滤过程中，要保持温度在4℃左右。收集洗脱液，分装后置于-20℃冰箱中保

存。

7.酶活性测定：取一定量的保存液，用适当的底物（如胃蛋白酶底物）进

行酶活性测定。根据测定的酶活性，计算胃蛋白酶的含量。

8.纯化：将测定酶活性的胃蛋白酶溶液进行纯化，常用的纯化方法有凝胶

过滤、离子交换层析等。纯化过程中，要保持温度在4℃左右。

9.冻干：将纯化后的胃蛋白酶溶液进行冻干处理，得到胃蛋白酶粉末。

10.质量检验：对制备的胃蛋白酶进行质量检验，包括酶活性、纯度、稳定

性等指标的检测。

注意事项：

1.在制备过程中，要严格控制温度和pH值，以保持胃蛋白酶的活性。

2.原料的选择和处理过程中，要注意卫生，避免污染。

3.离心、盐析、凝胶过滤等步骤中，要严格按照操作规程进行，确保实验

结果的准确性。

4.保存胃蛋白酶溶液时，要置于-20℃冰箱中，避免酶的降解。

5.纯化过程中，要根据实验结果调整纯化条件，以获得最佳的纯化效果。

6.在质量检验过程中，要严格按照检验规程进行，确保胃蛋白酶的质量符

合要求。