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DEL血型与抗-D同种免疫相关性及其机制的研究

人类红细胞血型系统种类众多,其中Rh血型系统是最复杂的系统,也是最具

多态性的血型系统。目前发现的Rh血型抗原已多达50种。

临床上根据能否在红细胞膜表面检测到相应的RhD抗原,将Rh血型分为RhD

阳性血型和RhD阴性血型两大类。其中RhD抗原是引起严重新生儿溶血病

(hemolyticdiseaseofnewborn,HDN)的主要红细胞抗原,在输血医学和产科学

中意义最为显著,是血型研究的重点。

通过红细胞膜表面表达的D抗原数量和质量以及抗原性质的区别,现将RhD

表型分为5种:正常D表型、弱D表型、增强D表型、表位不完全型D表型以及

表位不完全型弱D表型。弱D表型红细胞膜表面的D抗原表达较弱,是D抗原的

变异体的一种。

日本学者Okubo等早在1984年通过吸收放散试验对经间接抗人球蛋白试验

(indirectantiglobulintest,IAT)确认的RhD阴性样本进一步分析检测,显示

其红细胞膜表面仍可检测到微量的RhD抗原,称之为D放散型(DEL型)。它属于

弱D型的一种,抗原性极弱。

目前,已发现至少17种DEL型等位基因,包

括:RHD1227A,RHD(IVS3+1A),RHD885T,RHD(IVS5–

38del4),RHD1252T,RHD(delEx8),RHD1222C,RHD(IVS1+1A),RHD3A,RHD(L18P),RH

D(L84P),RHD(R10W),RHD(A137E),RHD-CE(4–9)-D,RHD-CE(2–5)-D,andRHD(1

–9)-CE。中国人群DEL型个体已被证实携带有RHD1227A等位基因。

与高加索人相比,DEL型在中国RhD阴性人群中比率较高,约占中国汉族RhD

阴性人群的1/3。在临床输血中,我国一直以来对RhD阴性献血员只做弱D检测

并未做DEL型检测,将DEL型血液视作RhD阴性血液用于RhD阴性患者的血液输

注,在一定程度上可能会影响RhD阴性患者血液输注的安全性。

同时,DEL型输血患者输注RhD阴性血液,也可能会在一定程度上造成RhD阴

性血液资源的浪费。本课题以DEL型孕妇妊娠RhD阳性胎儿作为临床上DEL型受

血者接受RhD阳性血液的模型,通过监测DEL型孕妇体内产生抗-D抗体产生情况

及胎儿是否发生HDN来评估DEL型受血者接受RhD阳性血液的风险性。

据此初步提出安徽地区汉族人群DEL型个体受血者的临床输血策略。从而在

一定程度上节约RhD阴性血液资源,同时提高输血安全性。

本研究选择DEL型献血者、接受DEL型血液的RhD阴性受血者、妊娠有RhD

阳性胎儿的DEL型孕妇等作为研究对象,采用RHD基因序列分析、红细胞膜表面

RhD抗原表位表达谱分析、抗-D效价测定及临床观察等方法,通过大样本量的实

验数据和临床资料探讨安徽地区汉族人群DEL型的基因结构及其红细胞膜表面

RhD抗原表位表达与抗-D同种免疫反应的相关性。通过观察接受DEL型血液的

RhD真阴性受血者体内抗-D产生情况来评估RhD真阴性受血者是否可以安全地接

受DEL型血液,即血液中心对RhD阴性血液是否有进一步进行DEL型检测的必要。

目的:检测安徽地区汉族人群DEL型个体的基因结构,发现除1227A等位基因

以外新的DEL等位基因。分析汉族人群中诱发或不诱发抗-D同种免疫反应的DEL

型红细胞膜表面RhD抗原表位表达情况,分析安徽地区汉族人群是否存在部分

DEL表型,为评价DEL型患者接受RhD阳性输血的可行性提供研究证据。

初步提出安徽地区汉族人群DEL血型的临床输血策略,从而在一定程度上节

约RhD阴性血液资源,提高输血安全性。方法:1.研究对象选择2008年1月~2017

年1月在安徽省立医院、安徽医科大学第一附属医院就诊的RhD阴性的患者共计

804例。

包括515例RhD阴性的孕妇及21例输注了DEL型血液的真阴性受血者。孕

妇的年龄在18~45岁。

平均孕龄为28.1周且均为单胎妊娠。2.筛选DEL型个体将待检红细胞用生

理盐水洗涤三遍后得到压积红细胞,取0.5~1ml压积红细胞,加入1ml三种不同

来源的IgG、IgM混合单克隆抗-D血清,充分混匀,置37℃水